شناسايي مولكولي سويه هاي وحشي ويروس برونشيت عفوني طيور در گله هاي گوشتي واكسينه استان مازندران

Molecular Identification of Wild Type Strains of Infectious Bronchitis Virus in Vaccinated Broiler flocks in Mazandaran Providence

بيماري برونشيت عفوني يكي از معضلات مهم صنعت پرورش طيور گوشتي در دنيا است و مطالعات اپيدميولوژي مولكولي و شناسايي مداوم تغييرات ژنتيكي در ميان ويروس‌هاي شايع در مزارع پرورشي نقش مهمي در كنترل، پيشگيري و طراحي واكسن‌هاي موثر بر عليه بيماري دارد. در تحقيق حاضر مزارع طيور گوشتي مشكوك به بيماري برونشيت عفوني در استان مازندران مورد آزمايش قرار گرفتند. بدين منظور، نمونه‌هاي سواب ناي از 28 گله جوجه گوشتي با علائم تنفسي و تلفات 15 تا 25 درصدي در سال 1396 جمع آوري شدند. براي تشخيص ويروس از روش واكنش زنجيره‌اي پلي‌مراز براي افزوده سازي ژن رپليكاز با پرايمرهاي اختصاصي ژن استفاده شد. سويه مرجع سويه H120 واكسن برونشيت بود. براي تفكيك سويه‌هاي وحشي از سويه‌هاي واكسينال از روش توالي يابي مستقيم استفاده شد. در آزمون مقدماتي (افزوده سازي)، در 82 درصد (28/23) از مزارعي كه مشكوك به عفونت ويروس برونشيت بودند حضور ويروس برونشيت عفوني تشخيص داده شد. بررسي تعيين توالي مشخص كرد كه 5 سويه وحشي در مزارع آلوده (19 مزرعه) وجود دارند. اين موضوع نشان دهي تنوع بالايي در جمعيت مورد مطالعه است. نتايج اين مطالعه نشان داد كه ظهور سويه‌هاي جديد ويروس برونشيت عفوني در طيور گوشتي استان مازندران مي تواند با شرايط پرورشي از جمله تراكم بالا و واكسيناسيون متنوع و مكرر مرتبط باشد.

Infectious bronchitis is one of the major problems in the poultry industry in the world. Molecular and epidemiological studies, as well as continuous identification of genetic variants among common viruses in farms, play an important role in controlling, preventing and designing effective vaccines against disease. In the current study, chicken flocks with suspected infections bronchitis virus (IBV) were examined in Mazandaran province. Tracheal swab specimens were collected from 28 broiler chickens with respiratory symptoms in northern Iran in autumn and winter of 1396. Mortality rates of 15 to 25 percent were reported in studied flocks. Polymerase Chain Reaction (PCR) was used to amplify the virus replicase gene using specific primers. The reference strain was the H120 bronchitis vaccine. Direct sequencing method was used to identify wild strains from vaccine strains. In the preliminary test, 82% (23/28) of the suspected farms has shown the presence of IBV. Using the sequencing analysis, 5 wild strains were detected in the infected flocks (19 farms), indicating a high diversity in the population under study. The results of this study showed that emerged of new strains of infectious bronchitis virus in broiler flocks in Mazandaran province could be related to breeding conditions such as high density and repeated vaccination and different type of vaccines.