عنوان مقاله :
تأثير همگرايي فاكتور رشد تغيير دهنده‌ي بتا (TGF-β) و هايپراسمولاريتي بر تمايز غضروفي و كاهش استخواني شدن بافت تازه سنتز شده
عنوان به زبان ديگر :
Synergistic Effects of Hyperosmolarity and Transforming Growth Factor Beta (TGF-β) on Chondrogenic Differentiation and Reducing Neotissue Ossification
پديد آورندگان :
كنار، الهام دانشگاه شهيد چمران اهواز - دانشكده ي علوم - گروه زيست شناسي , خاتمي، سعيدرضا دانشگاه شهيد چمران اهواز - دانشكده ي علوم - گروه زيست شناسي , حنايي اهواز، هنا مركز تحقيقات فن آوري بن ياخته - گروه سلولهاي بنيادي، تهران , شفيعي، محمد دانشگاه شهيد چمران اهواز - دانشكده ي علوم - گروه زيست شناسي , حجاري، محمدرضا دانشگاه شهيد چمران اهواز - دانشكده ي علوم - گروه زيست شناسي
كليدواژه :
سلول هاي بنيادي مزانشيمي , تمايز سلولي , پلاسماي غني از پلاكت , كندروسيت
چكيده فارسي :
مقدمه: سلولهاي بنيادي مزانشيمي (Mesenchymal stem cells يا MSCs)، سلولهاي بنيادي چند توانه‌اي هستند كه تمايز آن‌ها به كندروسيت‌ها در سال‌هاي اخير مورد توجه قرار گرفته است. پلاسماي غني از پلاكت (Platelet-rich plasma يا PRP)، به دليل غني بودن از فاكتورهاي رشد متعدد و عامل هايپراسمولاريتي، به دليل نزديك كردن محيط تمايزي به محيط اصلي كندروسيت‌ها، مي‌تواند بر اين تمايز مؤثر باشد. با توجه به ايجاد عامل نامطلوب هايپرتروفي و استخواني شدن، پژوهش حاضر با هدف دستيابي به يك محيط بهينه‌ي تمايز غضروفي بر MSCs انساني انجام شد.
روش‌ها: MSCs بافت چربي انساني استخراج و به رده‌ي سلولي غضروف تمايز داده شد. اثر محيط‌هاي پايه حاوي فاكتور رشد تغيير دهنده‌ي بتا (Transforming growth factor beta يا TGF-β)، PRP)، هايپراسمولاريتي، محيط پايه + هايپراسمولاريتي و PRP + هايپراسمولاريتي بر تمايز غضروفي با استفاده از رنگ‌آميزي‌هاي اختصاصي شامل Alcian blue، هماتوكسيلين ائوزين (Hematoxylin and Eosin يا H&E) و ايمونوسيتوشيمي كلاژن نوع 2 و 10 بررسي گرديد. شاخص‌هاي بيوشيميايي شامل فعاليت Alkaline phosphatase (ALP) و رسوب كلسيم و بررسي بيان ژن‌هاي Col2، Sox9، Smad2 و Aggrecan نيز با استفاده از روش Real-time polymerase chain reaction (RT-PCR) مورد سنجش قرار گرفت.
يافته‌ها: MSCs بافت چربي انساني با دارا بودن قدرت تمايز به رده‌ي سلولي چربي و استخوان، ويژگي‌هاي سلولهاي غضروفي را در همه‌ي گروه‌هاي تمايزي نشان داد. فعاليت ALP و ميزان رسوب كلسيم در گروه تمايزي پايه + هايپراسمولاريتي نسبت به ساير گروه‌ها كمتر بود.
نتيجه‌گيري: گروه تمايزي پايه + هايپراسمولاريتي مي‌تواند محيط بهتري جهت تمايز غضروفي باشد.
چكيده لاتين :
Background: Mesenchymal stem cells (MSCs), are multipotent stem cells that their differentiation to
chondrocytes is considered in recent years. Platelet-rich plasma (PRP), because of rich of several growth factors,
and also hyperosmolarity, because of stimulating differentiation culture medium to original medium of
chondrocytes, can affect this differentiation. Considering hypertrophy and ossification as resulted adverse
factors, this study aimed to achieve an optimal medium for chondrogenic differentiation of human MSCs.
Methods: MSCs were extracted from adipose tissue, and differentiated to chondrocyte line. The effect of base
medium containing transforming growth factor beta (TGF-β), PRP, hyperosmolarity, base + hyperosmolarity and
PRP + hyperosmolarity on chondrogenic differentiation was assessed using special staining methods such as
Alcian blue, hematoxylin and eosin (H&E), and collagen type II and X immunocytochemistry, measurement of
biochemical indexes including alkaline phosphatase (ALP) activity and deposit of calcium, and study of
expression of Col2, Smad2, Sox9, and Aggrecan genes using real-time polymerase chain reaction (RT-PCR).
Findings: Human adipose tissue derived MSCs, with differentiation ability to adipocyte and osteocyte lines,
were presented characterizations of chondrocytes in all differentiation groups. In base + hyperosmolarity group,
ALP activity and deposit of calcium were less than other groups.
Conclusion: Base + hyperosmolarity differentiation group can be a better culture medium for chondrogenic differentiation.
عنوان نشريه :
مجله دانشكده پزشكي اصفهان
