مقايسه اثرات سمي‌ عصاره هيدروالكلي شقايق كوهي( Glaucium flavum) بر رده سلول‌هاي سرطاني گليوبلاستوما و سلول‌هاي عصبي غيرسرطاني

Comparison of the Toxic Effects of Hydroalcoholic Extract of Glaucium flavum on Glioblastoma and Non-Cancer Nerve Cells

زمينه و هدف: تومورهاي گليوبلاستوما جزء تهاجمي­ ترين تومورهاي مغزي با منشا بافت عصبي مغز مي­ باشند. پايين بودن موفقيت­ هاي درمان اين نوع تومورها، نياز به جستجو براي راهكارهاي جديد درماني را توجيه مي­كند. شقايق ­كوهي به دليل سرشار بودن از تركيبات آلكالوئيدي به طور گسترده در صنعت داروسازي كاربرد دارد. هدف از اين مطالعه تعيين و بررسي اثرات سمي‌عصاره هيدروالكلي شقايق­كوهي بر رده سلول ­هاي سرطاني گليوبلاستوما و سلول‌هاي غيرسرطاني عصبي بود. روش بررسي: اين يك مطالعه تجربي مي‌باشد كه در سال 1398 در آزمايشگاه تحقيقاتي كشت سلول دانشگاه شهيد چمران اهواز به انجام رسيده است. يك موش باردار در اين مطالعه براي جداسازي سلول استفاده شد. ابتدا عصاره‌گيري از شقايق كوهي صورت گرفت و سلول‌هاي پيش‌ساز عصبي از كورتكس مغز جنين­‌هاي موش سوري باردار 17روزه با روش هضم آنزيمي‌استحصال شد. سپس با غلظت‌هاي 100، 300، 500 و 1000 ميكروگرم بر ميلي­ليتر شقايق كوهي، سلول­ها در دو بازه زماني 24 و 72 ساعت تيمار شدند. پس از تيمار بقاء سلول‌ها با روش فتومتريك MTT و مورفولوژي هسته سلول­ها با رنگ‌آميزي فلوروسنت DAPI ارزيابي شد. داده‌ ها با استفاده از آزمون‌ آماري آنوا يك طرفه تجزيه و تحليل شدند. يافته‌ها: سلول­هاي مورد آزمايش پس از تيمار با غلظت IC50 شقايق­كوهي، دچار تغييرات مورفولوژي شدند. ارزيابي بقاي سلولي با روش MTT نشان داد كه شقايق كوهي باعث كاهش معني‌دار بقاي سلول­هاي C118 و هم‌چنين نوروسفرهاي عصبي(NCs) در هر دو بازه زماني 24 و 72 ساعت مي‌شود. شدت سميت سلولي شقايق كوهي بر سلول­هاي گليوبلاستوما نسبت به نوروسفرهاي عصبي بيشتر بود و اختلاف معني‌داري را نشان مي­دهد(05/0p<). هم‌چنين نتايج كمي‌بقاي سلولي نشان داد كه غلظت 300 و 500 ميكروگرم بر ميلي‌ليتر عصاره شقايق كوهي به ترتيب غلظتIC50 براي سلول‌هايC118 و NCs بوده است. نتيجه‌گيري: فرآورده‌هاي طبيعي از جمله شقايق كوهي با خاصيت فارموكولوژيك و بيوشيميايي آنتي‌اكسيداني و ضد التهابي خود و با توجه به اين كه اثرات جانبي كمتري بر سلول هاي غيرسرطاني دارند، مي ­توانند در درمان سرطان گليوبلاستوما مؤثر باشد.

Background & aim: Glioblastoma tumors are one of the most invasive brain tumors of neural tissue origin. The low success rates of these types of tumors require the search for new treatment options. Glaucium flavum is widely used in the pharmaceutical industry because of its high content of alkaloids. The aim of this study was to determine and evaluate the toxic effects of hydroalcoholic extract of Glaucium flavum glioblastoma and non-cancerous nerve cells. Methods: the present research was an experimental study carried out in the cell culture research laboratory of Shahid Chamran University of Ahvaz in 2019. A pregnant rat was used in this study for cell isolation. The Glaucium flavum extract was first extracted and nerve progenitor cells then extracted from the brain cortex of 17-day-old pregnant mouse embryos by enzymatic digestion. Cells were then treated with Glaucium flavum at concentrations of 100, 300, 500, and 1000 μg/ml for 24 and 72 h. After treatment, cell viability was assessed by MTT photometric method and cell morphology was evaluated by DAPI fluorescent staining. Data were analyzed using one-way ANOVA. Results: Morphological changes were observed in the cells treated with IC50. Evaluation of cell survival by MTT assay showed that the Glaucium flayum extract significantly decreased the survival of C118 cells as well as neural neurospheres (NCs) at both 24 and 72 h intervals. The severity of Glaucium flayum extract cytotoxicity on glioblastoma cells was higher than the neurospheres and showed a significant difference (p <0.05). The results of cell viability also showed that the concentration of 300 and 500 μg/ml of the Glaucium flayum extract was IC50 for C118 and NCs cells respectively. Conclusion: It was concluded that natural products such as Glaucium flayum extract with pharmacological and biochemical properties had antioxidant and anti-inflammatory properties and have less adverse effects on non-cancerous brain cells than in non-cancerous cells.