بررسي اثر رزمارينيك اسيد در القاي تمايز عصبي در سلول‌هاي بنيادي ژله‌ي وارتون

Evaluation of the Effect of Rosmarinic Acid in Induction of Neural Differentiation in Wharton’s Jelly Stem Cells

مقدمه: رزمارينيك اسيد، يك تركيب فنولي است كه خاصيت حفاظت عصبي دارد و در بهبود بيماري‌هاي سيستم عصبي مانند پاركينسون و آلزايمر تأثير مثبتي داشته است. همچنين، باعث افزايش بيان عوامل نوروتروفيك نظير Brain-derived neurotrophic (factor (BDNF مي‌شود و مي‌تواند در تمايز سلول‌هاي بنيادي به عصبي نقش داشته باشد. روش‌ها: سلول‌هاي بنيادي ژله‌ي وارتون پس از جداسازي، تأييد و تكثير، در محيط كشت القا كننده‌ي تمايز عصبي و حاوي رزمارينيك اسيد قرار داده شدند. به منظور سنجش سميت، از آزمون MTT استفاده شد. براي بررسي اثر رزمارينيك اسيد بر القاي تمايز عصبي در سلول‌هاي بنيادي ژله‌ي وارتون، پس از 4 روز بيان ژن‌هاي Nestin و β-Tubulin III به روش Real-time polymerase chain reaction (Real-time PCR) مورد ارزيابي قرار گرفت. يافته‌ها: نتايج آزمون MTT نشان داد اختلاف معني‌داري در بقاي سلول‌هايي كه در تماس با محيط كشت حاوي رزمارينيك اسيد بودند، نسبت به گروه شاهد وجود نداشت (0/05 > P). نتايج Real-time PCR نشان داد افزودن رزمارينيك اسيد به محيط كشت القا كننده‌ي تمايز عصبي، باعث افزايش بيان ژن‌هاي Nestin و β-Tubulin III مي‌شود (0/050 > P). نتيجه‌گيري: افزايش بيان Nestin و β-Tubulin III در حضور رزمارينيك اسيد، مي‌تواند نشان دهنده‌ي القاي بيشتر تمايز عصبي در سلول‌هاي بنيادي ژله‌ي وارتون باشد. نتايج به دست آمده، نشان مي‌دهد رزمارينيك اسيد بر سلول‌هاي بنيادي ژله‌ي وارتون اثر القا كننده‌ي تمايز عصبي دارد.

Background: Rosemarinic acid is a phenolic compound that has neuroprotective properties. It has beneficial effect in neurological diseases such as Parkinson's and Alzheimer's. Rosmarinic acid increases the expression of neurotrophic factors such as brain-derived neurotrophic factor (BDNF), which can contribute in neuronal differentiation of stem cells. Methods: After isolation and proliferation, Wharton’s jelly stem cells were placed in inductive culture medium containing Rosmarinic acid. MTT assay was used to evaluate toxicity. After 4 days, induction of neuronal differentiation in Wharton’s jelly stem cells was evaluated using real-time polymerase chain reaction (real-time PCR) via analyzing the expression of Nestin and β-Tubulin III genes. Findings: MTT assay showed was no significant difference in viability between cells cultured in culture medium with Rosmarinic acid and control group (P < 0.05). Real-time PCR showed that adding Rosmarinic acid to culture medium increased the expression of Nestin and β-Tubulin III genes (P < 0.05). Conclusion: Increasing the expression of β-Tubulin III and Nestin, when there is Rosmarinic acid, may indicate a greater induction of neuronal differentiation in Wharton’s jelly stem cells. The results show that Rosmarinic acid induces the neuronal differentiation of Wharton’s jelly stem cells.