جداسازي وكشت سلول هاي مشتق ازاندومتررحم انسان به عنوان مدل آزمايشگاهي انساني در مطالعات لانه‌گزيني در آينده

Isolation and culture of human endometrial derived cells as an in vitro model for future implantation studies

مقدمه: بازسازي ماهيانه بافت اندومتر رحم انساني، تحت تأثير تغييرات هورموني، تاييد‌كننده وجود جمعيتي از سلول­ها در لايه قاعده‌اي اندومتر مي­باشند كه رحم را جهت لانه­گزيني مناسب، آماده مي­كنند. اين جمعيت سلولي تحت عنوان سلول­هاي بنيادي/ استرومايي شناخته شده­اند. مطالعه حاضر با هدف جداسازي بافت اندومتر رحم انسان جهت كشت سلول­هاي بنيادي/ استرومايي مزانشيمي در محيط آزمايشگاهي انجام پذيرفت. روش بررسي: در اين مطالعه، بخشي از بافت رحم، از بيوپسي يك بيمار كه به مركز تحقيقاتي درماني ناباروري پژوهشكده علوم توليد‌مثل يزد مراجعه كرده بودند، پس از كسب رضايت­نامه جداسازي شده و به مركز تحقيقات بيولوژي سلول­هاي بنيادي انتقال يافت. تكه­هاي بافت رحم پس از مجاورت با آنزيم، روز بعد شستشو داده شد و سلول­هاي جداسازي شده كشت داده شدند. نتايج: سلول­هاي بافت اندومتر رحم انساني بعد از قرارگيري در معرض آنزيم به‌‌صورت مكانيكي جداسازي شده و در شرايط آزمايشگاهي كشت داده شدند. سلول­هاي حاصل از لحاظ مورفوفنوتيپي مورد بررسي قرار گرفتند كه شباهت بسيار زيادي با سلول­هاي بنيادي/ استرومايي مزانشيمي داشتند. نتيجه‌گيري: نتايج اين كار، مطالعات قبلي جداسازي و كشت سلول­هاي بنيادي/ استرومايي مزانشيمي را تاييد مي­كند. بافت اندومتر بخشي از رحم مي­باشد كه منبع سلول­هاي بنيادي/ استرومايي مزانشيمي با توانايي خود نوزايي و تمايز تحت تأثير سيكل ماهيانه در طول زندگي طبيعي خانم­ها است. در اين راستا، از اين سلول­ها مي­توان در آينده به‌عنوان روشي نوين در پزشكي بازساختي و درمان بيماران نابارور، از جمله سقط مكرر و حل مشكلات رحم اجاره­اي استفاده نمود.

Introduction: Monthly regeneration of endometrium after cyclical mensturation confirmed the ability of specific population of the cells that presence in the basalis layer and undergone consecutive hormonal changes that could prepared the endometrial layer for probable implantation. These cells, known as, stem cell. The aim of this study was the isolation and culture of human endometrial derived mesenchymal stem/stromal cells (EnMSCs). Methods: .In this study, human endometrial tissues were collected after fully-informed patient consent, which attended the Research and Clinical Center for Infertility. After washing and enzymatic treatment, EnMSCs were isolated and cultured in vitro. Results: Cells from endometrium were successfully isolated using enzymatically treatment and mechanically dissociation, then cultured and expanded for several passages for further characterization and evaluations. Endometrium derived cells were morphologically similar to mesenchymal stem/stromal cells (MSCs). Conclusion: The results of the present study confirm previous reports in vitro studies for the isolation and culture of human EnMSCs. Endometrial tissue is a part of uterus with available source of MSCs with self-renewal and differentiation capacity that undergoes a cyclical regeneration every month in normal women’s life span. In this regard, human EnMSCs could be used for future novel therapeutic methods in regenerative medicine for treatment of uterine-factor infertile patients, which can lead to recurrent pregnancy loss (RPL) and finally resolve of surrogacy problems.