تغيير بيان ژن هاي آپوپتوزي BAK، FAS، BAX، TNF-a، BCL-2 و Survivin در سلول هاي آدنوكارسينوماي پستان انسان (MCF-7) به وسيله انتروتوكسين B استافيلوكوكي

Change in the Expression of BAK، FAS، BAX، TNF-A، BCL-2 and Survivin Apoptosis Genes of the Human Breast Adenocarcinoma Cells (MCF-7) by Staphylococcal Enterotoxin B

مقدمه: سرطان سينه يكي از شايع­ترين بدخيمي­ها در ميان زنان مي­باشد. مبتلايان به اين عارضه در نتيجه‌ استفاده از راهكارهاي درماني داراي پاسخ به درمان ضعيفي هستند و عود مجدد در ميان آن‌ها به فراواني ديده مي‌شود. در اين مطالعه اثر انتروتوكسين B استافيلوكوكي بر بيان ژن­هاي BAK، FAS، BAX، TNF-a، BCL-2 و Survivin در سلول­هاي آدنوكارسينوماي پستان انسان (MCF-7) مورد بررسي قرار گرفت. انتروتوكسين B استافيلوكوكي عضو توانمندي از خانواده سموم استافيلوكوكوس اورئوس مي­باشد كه به عنوان يك عامل ضد سرطان با توانايي انهدام سلول­هاي سرطاني شناخته مي­شود. روش بررسي: اين مطالعه به صورت تجربي در مركز تحقيقات بيوتكنولوژي دانشگاه آزاد اسلامي واحد شهركرد انجام شد. سلول­هاي رده MCF-7با استفاده از معرف ليپوفكتامين 2000، به‌وسيله‌ پلاسميدهاي pcDNA3.1(+)-seb (نوتركيب) و pcDNA3.1(+) (غيرنوتركيب) ترانسفورم شدند و با كشت در محيط انتخابي RPMI-1640 محتوي600 μg/mL آنتي‌بيوتيك G418 انتخاب گرديدند. سپس ميزان بيان ژن­هاي BAK، FAS، BAX، TNF-a، BCL-2، Survivin در سلول­هاي ترانسفكت شده از طريق آناليز Real Time-PCR مورد بررسي قرار گرفت. آناليز آماري با استفاده از آزمون تي- استيودنت از طريق نرم‌افزار SPSS Inc., Chicago, IL; Version 16 و هم‌چنين برنامه Excel مورد بررسي قرار گرفت. نتايج: نتايج حاصل از اين تحقيق حاكي از آن است كه، انتروتوكسين B استافيلوكوكي به‌طور قابل‌توجهي بيان ژن­هاي آپوپتوزي را در سلول­هاي رده MCF-7 تغيير مي­دهد. در حاليكه افزايش بيان معني­داري براي ژن­هاي BAK، FAS، BAX، TNF-a، مشاهده گرديد، بيان ژن­هاي BCL-2، Survivin به‌طور معني­داري كاهش را در مقايسه با گروه كنترل نشان داد. (032/P=) نتيجه‌گيري: انتروتوكسين B استافيلوكوكي داراي اثر مهاري بر رشد، تكثير و تهاجم سلول­هاي آدنوكارسينوماي پستان از طريق تغيير بيان ژن­هاي دخيل در مسير آپوپتوز مي­باشد. لذا به نظر مي­رسد زمينه تحقيقاتي مناسبي براي بهره برداري از اين سم در كنترل و درمان آدنوكارسينوماي پستان انسان وجود داشته باشد.

Introduction: Breast cancer is one of the most prevalent malignancies among women. Patients whose suffering from this condition, as a result of the use of conventional therapies often have a poor response to treatment and the relapse among them is frequent. In this study, the effects of staphylococcal enterotoxin type B on BAK، FAS، BAX، TNF-a، BCL-2 و Survivin genes expression in human breast adenocarcinoma cells (MCF-7) was examined. Staphylococcal enterotoxin B is a powerful member of the Staphylococcus aureus toxins family, which is known as an anticancer agent with potential for killing cancer cells. Methods: The experimental study was carried out at the Biotechnology Research Center of Islamic Azad University, Shahrekord Branch. By using Lipofectamine 2000 reagent, MCF-7 cells transfected with the pcDNA3.1(+)-seb (recombinant) and pcDNA3.1(+) (non-recombinant) plasmids and were selected by culturing in a selective medium of RPMI- 1640 containing 600 μg / mL antibiotic G418. Then, the expression of BAK, FAS, BAX, TNF-a, BCL-2, and Survivin genes in transfected cells were analyzed by real time PCR. Student's t-test, SPSS Inc., Chicago, IL; Version 16 and also Excel program for statistical analysis were used. Results: The results of this study indicated that staphylococcal enterotoxin type B (SEB) remarkably changes the expression of apoptotic related genes in MCF-7 cell line. It was observed a significant increase in the expression of BAK, FAS, BAX, and TNF-a genes, the expression of BCL-2 and Survivin genes significantly decreased compared to the control group (P=0/032). Conclusion: Staphylococcal enterotoxin type B has an inhibitory effect on the growth, proliferation and invasion of breast adenocarcinoma cells through altering the expression of the genes involved in the apoptosis process. Therefore, it seems that there is a good research field for the use of this toxin in the control and treatment of human breast adenocarcinoma.