بررسي تاثير تقويت‌كننده رتينوئيك اسيد بر تمايز سلول‌هاي مزانشيمال مشتق شده از مغز استخوان رت به سلول‌هاي بتا و ترشح انسولين

Evaluation of Potential Effect of Retinoic Acid on the Differentiation of Rat Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells into the Beta Cells and Insulin

سلول هاي بنيادي مزانشيمال از انواع بافت هاي adult انسان مشتق مي شود و خودسازي و تمايز به انواع سلولي را تقويت مي كند. رتينوئيك اسيد (ra) براي توسعه جنيني پانكراس ضروري است. اثر ra در تمايز سلول هاي بنيادي مزانشيمال مشتق از مغز استخوان (bmmscs)، به سلول هاي بتا موردمطالعه قرار گرفت.مواد و روش ها: مغز استخوان رت ها، با استفاده از روش flashing، تهيه شدند و با روش فلوسيتومتري ماركرهاي سطحيbmmscs تائيد شدند.bmmscs در چهار گروه تيمار گرديدند 1) عصاره پانكراس رت يا rpe(250 µg/ml)، 2) rpe (250 µg/ml) + ra (10 µm)، 3) گروه بدون تيمار 4) گروه الكل 10% به عنوان حامل و گروهra (10 µm) به عنوان كنترل. ترشح انسولين با روش elisa ارزيابي شد. بيان انسولين با روش rtpcr تعيين گرديد.نتايج: نتايج حاصل از rtpcr نشان دادند كه انسولين در گروه rpe و rpe + ra بيان شد. ترشح انسولين با تست ويلكاكسون در گروه rpe + ra به طور معني داري بيش از گروه rpe است (p<0.05).نتيجه گيري: اين مطالعه نشان داد كه ra تمايز سلول هاي bmmscs را به سلول هاي توليدكننده انسولين تقويت مي كند و ترشح انسولين در اين سلول ها را افزايش مي دهد.

Mesanchymal stem cells (MSCs) derived from a variety of human adult tissues and potentiate to self-replicate and differentiate into different cell types. Retinoic acid (RA) is important in embryonic development of pancreas. The effect of RA on transdifferentiation of rat bone marrow mesanchymal stem cells (BMMSCs) into the beta cells was studied. Materials & methods Rat BMMSCs were prepared by flashing method and confirmed by evaluating of BMMSCs surface markers. BMMSCs were treated in four groups by: 1) rat pancreatic extract (RPE) (250µg/ml) 2) RPE (250µg/ml) + RA (10µM), 3) no treated group as control and 4) ethanol 10% as vehicle and RA(10µM) as control. Insulin secretion was evaluated by ELISA assay. Insulin expression (RT-PCR) were determined. Results RT-PCR results showed that insulin expression in RPE and RPE + RA groups. Insulin releasing in group RPE + RA was significantly more than group 1, (p-value < 0.05), Wilcoxon test.. Conclusion Our study showed that RA can promote differentiation of the BMMSCs into the insulin producing cells invitro.