آناليز مولكولي هفت سويه لاكتوباسيلوس جداشده با منشأ انساني در غرب مازندران به منظور شناسايي جدايه‌هايي با توانايي پروبيوتيكي

Molecular analysis of seven Lactobacillus strains isolated from human origin in West of Mazandaran.

زمينه و هدف: سرطان كلوركتال به عنوان يكي از مهم‌ترين علل مرگ ناشي از سرطان در جهان است. خواص ضدسرطاني باكتري‌هاي پروبيوتيك در درمان سرطان كلوركتال گزارش شده است. هدف از اين مطالعه بررسي مولكولي و ارزيابي قابليت پروبيوتيكي چند جدايه باكتريايي گردآوري‌شده از نمونه‌هاي مدفوع واقع در غرب استان مازندران بود تا در صورت تأييد توانايي پروبيوتيكي، در مطالعات آينده اثر آنها بر رده سلول‌هاي سرطاني مطالعه شود. مواد و روش كار: در اين مطالعه از 60 نمونه مدفوع جمع‌آوري‌شده از افراد بالغ و خردسال سالم، 50 ايزوله باكتريايي جداسازي شد. پس از اجراي تست‌هاي بيوشيميايي، حساسيت آنتي‌بيوتيكي براي تعيين سويه‌هاي اسيد لاكتيكي با 15 آنتي‌بيوتيك انجام شد. سپس تحمل pH و نمك‌هاي صفراوي اندازه‌گيري شد. آناليز مولكولي اين سويه‌ها به روش PCR-سكوئنسينگ انجام شد و از نتايج آن براي رسم درخت فيلوژنتيكي استفاده شد. يافته‌ها: از 50 جدايه، 7 جدايه باكتري اسيد لاكتيك و دو سويه كاملاً خاصيت پروبيوتيك داشتند. اين سويه‌ها به pH پايين و نمك صفراوي 0/3 درصد مقاوم بودند. آناليز مولكولي نشان داد دو سويه SE و SG به ترتيب پروبيوتيك‌هاي مربوط به خانواده‌هاي لاكتوباسيلوس فرمانتوم (با همولوژي 86 درصد) و لاكتوباسيلوس رامنوسوس (با همولوژي 61 درصد) بودند كه به عنوان سويه‌هاي جديد شناخته شدند. نتيجه‌گيري: نتايج پيشنهاد مي‌كند 7 سويه با تحمل مناسب در مجراي گوارشي وجود دارد كه از خانواده لاكتوباسيل‌ها هستند و اين امر زمينه‌ساز بررسي مطالعات اميدوارانه در آينده به منظور بررسي ويژگي‌هاي ضدتوموري آنها و درنهايت تجويز خوراكي آنها است.

Background and Aims: Colorectal cancer is considered to be an important cause of morbidity and mortality worldwide. Anti-cancer properties of probiotic lactic acid bacteria are considerable for treatment of cancers such as colorectal cancer. The aim of this study was to investigate the molecular characterization of probiotic bacterial isolates from collected stool specimens in west of Mazandaran province, in order to confirm the probiotic effect of isolated strains, so to compare their effect on cancer cell lineages, in future studies. Materials and Methods: In this study, out of 60 stool samples collected from healthy children and adult people, 50 bacterial strains were isolated. Antibiotic susceptibility was performed by 15 antibiotics for 7 strains. Then, pH and bile salts tolerance were measured in the strains. Molecular analysis of these strains was carried out by PCR-sequencing and their results were used to draw a phylogenetic tree. Results: Of the 50 isolates, 7 isolates were lactic acid bacteria and two strains were completely probiotic. These strains were resistance to low pH and 0.3% bile salt. Molecular analysis showed that two strains SE and SG were probiotics related to Lactobacillus fermentum (86% homology) and Lactobacillus rhamnosus (61% homology) family, respectively, which were known as new strains. Conclusion: The results suggested that there are 7 strains with good tolerance in the gastrointestinal tract that have probiotic properties and this is the basis of future studies to evaluate their anti-tumor properties and ultimately oral administration.