بررسي سطح بيان افلاكس پمپ MexAB-OprM در ايزوله‌هاي باليني سودوموناس آئروژينوزا جدا شده از بخش مراقبت‌هاي ويژه

Investigation of MexAB-OprM efflux pump gene expression in clinical isolates of pseudomonas aeruginosa isolated from Intensive Care Unit

زمينه و هدف: سودوموناس آئروژينوزا از جمله عوامل مهم عفونت‌هاي بيمارستاني به ويژه در بخش مراقبت‌هاي ويژه (ICU) است كه مقاوم به طيف گسترده‌اي از آنتي بيوتيك ها به خصوص كارباپنم ها است. از جمله مكانيسم‌هاي مقاومت به كارباپنم‌ها افلاكس پمپ MexAB-OprM است. لذا هدف از اين مطالعه ارزيابي سطح بيان ژن‌هاي افلاكس پمپ MexAB-OprM در ايزوله‌هاي باليني سودوموناس آئروژينوزا جدا شده از بخش ICU بود. مواد و روش‌كار: 33 ايزوله باليني از بيماران بستري در بخش ICU از بيمارستان‌هاي آموزشي همدان در طي سال‌هاي 1396-1397 جمع آوري شدند. آزمون تست حساسيت آنتي بيوتيكي ايزوله‌ها به روش ديسك ديفيوژن و تعيين حداقل غلظت مهاري (MIC) براي ايمي‌پنم به روش Etest انجام شد. سطح بيان ژن‌هاي افلاكس پمپ MexAB-OprM توسط Real-Time PCR اندازه گيري شد. يافته‌ها: نتايج نشان داد كه بالاترين ميزان مقاومت در برابر سفترياكسون 21 (63/63%) و كمترين مقاومت در برابر پيپراسيلين 11 (33/33%) بود. حداقل غلظت مهاركنندگي ايمي‌پنم نشان داد كه از ميان 33 نمونه سودوموناس آئروژينوزا ايزوله شده از بخش ICU، 14 (42/42٪) و 19 (57/57%) ايزوله به ترتيب MIC مقاوم و حساس را نشان دادند. افزايش بيان ژن‌هاي MexA، MexB، OprM در مقايسه با سويه كنترل به ترتيب در 20% (4/20)، 25% (5/20) و 20% (4/20) از ايزوله‌ها مشاهده شد. نتيجه‌گيري: افزايش بيان ژن‌هاي افلاكس پمپ MexAB-OprM از جمله مكانيسم‌هاي شايع در مقاومت ايزوله‌هاي سودوموناس آئروژينوزا در برابر آنتي‌بيوتيك‌هاي كارباپنم در بخش‌هاي مختلف بيمارستان به ويژه مراقبت‌هاي ويژه مي‌باشد. لذا شناسايي مكانيسم‌هاي مقاومت به آنتي‌بيوتيك‌هاي كارباپنم مي‌تواند در كنترل و درمان چنين سويه‌هاي مقاومي مفيد باشد.

Background and Aims: Pseudomonas aeruginosa is one of the most important pathogens of nosocomial infections, especially in the ICU (Intensive Care Unit), which has resistance to a wide range of antibiotics, especially Carbapenems. Among the most important resistance mechanisms of this bacteria against carbapenems are MexAB-OprM efflux pump. Therefore, the aim of this study was to evaluate the gene expression of MexAB-OprM efflux pump in clinical isolates of P. aeruginosa that isolated from ICU. Materials and Methods: A total of 33 sampales were isolated from patient in ICU units from different Hamadan hospitals, since november 2018 to May 2019. Antibiotic susceptibility testing was performed using disk diffusion and Minimal Inhibitory Concentration (MIC) methods by Etest for imipenem. Expression levels of MexAB-OprM efflux pump genes were measured by Real-Time PCR. Results: The results of statistical analysis showed that the highest resistance was to Ceftriaxone 21 (63.63%) and the lowest resistance was to piperacillin, 11 (33.33%). The results of the MIC of imipenem showed that among off 33 samples isolated from the ICU, 14 (42.42%) and 19 (57.57%) isolates were resistant and susceptible, respectively. Increased expression of of MexA, MexB and OprM genes compared with control strain were observed in 20% (4/20), 25% (5/20) and 20% (4/20) of isolates, respectively. Conclusion: Increased expression of MexAB-OprM efflux pump is one of the most common mechanisms in the resistance of P. aeruginosa isolates against Carbapenem antibiotics in different units of hospitals especially intensive care unit. So identification of resistance mechanisms to Carbapenem antibiotics can be useful in controlling and treating such resistant isolates.