جداسازي زهر عروس دريايي Rhopilema nomadica ازسواحل خليج فارس و بررسي اثر ليز كنندگي آن

Extraction the venom of Rhopilema nomadica from the Persian Gulf coast and the investigation of its hemolytical activity

مقدمه: خليج فارس يكي از مكانهاي زيست گونه هاي مختلف عروس دريايي ميباشد. اكثر گونه هاي عروس دريايي، سمي هستند. زهر عروس دريايي Rhopilema nomadica (ازگونه هاي خليج فارس) تركيبي پروتئيني و با اثرات نورتوكسين، سيتوليزين و هموليزين مي باشد. هدف از اين تحقيق جداسازي و بررسي زهر R.nomadicaو مطالعه اثرات هموليتيكي آن روي سلولهاي خوني ميباشد. مواد و روش ­ها: R.nomadica از ناحيه جزر و مدي ساحل شمالي جزيره قشم نمونه برداري شد و پس از انتقال به آزمايشگاه بندرعباس با روش بهينه شده اي، زهر آن استخراج و با استفاده از ژل كروماتوگرافي سفادكسG200 جداسازي شد. براي بررسي وزن ملكولي تركيبات آن از ژل الكتروفورز SDS-PAGE استفاده شد. ميزان كشندگي زهر استخراج شده، با تزريق زير جلدي به موش نژاد سوري بررسي شد و سپس فعاليت ليزكنندگي زهر روي سلولهاي قرمز گونه هاي مختلف مورد ارزيابي قرار گرفت. يافته ها: زهر R.nomadica با روش بهينه شده اي از نماتوسيتها جداسازي شد و پس از تعيين غلظت پروتئين به مقدار 7/1 ميلي گرم در ميلي ليتر و عبور از ستون ژل كروماتوگرافي ، دو پيك بدست آمد. وزنهاي ملكولي 45، 65 و 95 كيلودالتون پس از عبور از ژل الكتروفورز SDS-PAGE مشخص گرديد. مقدار كشندگي زهر ( LD50) تعيين شد. سپس ميزان فعاليت ليزكنندگي زهر مورد ارزيابي قرار گرفت. بحث و نتيجه ­گيري: وجود تركيبات فعال در زهر R.nomadica موجب آسيب به شناگران ميشود ، اثر ليزكنندگي زهر به غلظت زهر و نوع سلول هاي خوني بستگي دارد و در گونه هاي مختلف ، متفاوت مي باشد . گلبولهاي قرمز موش نسبت به انسان و گوسفند قابليت ليز شوندگي بيشتري دارند.

Background: The Persian Gulf is one of the habitats of different species of jellyfish. Most jellyfish species are venomous. The venom of Rhopilema nomadica jellyfish, which is found in the Persian Gulf, is a compound protein with the effects of neurotoxin, cytolysin and hemolysin. The purpose of this study is the isolation and characterization of R. nomadica venom and the investigation of its hemolytic effects on blood cells. Materials and Methods: The R. nomadica was sampled from the tidal zone of the northern coast of Qeshm Island. After it was transferred to a laboratory in Bandar Abbas with an optimized method, the venom was extracted and isolated by the Sephadex G200 chromatography gel. SDS-PAGE gel electrophoresis was used to evaluate the molecular weight of its compounds. The lethal dose of the isolated venom was assessed by subcutaneous injection into the mice, and then the hemolytic activity on erythrocytes of different species was evaluated . Results: R. nomadica venom was isolated from nematocytes by an optimized method, and after determining the protein concentration of 1.7 mg / ml and passing the chromatography column, two peaks were obtained. The molecular weights of 45, 65 and 95 kDa were determined by passing through the SDS-PAGE gel electrophoresis. Subsequently, the lethal dose (LD50) was detected, and the rate of activity of the venom was evaluated. Conclusion: The existence of active compounds in the venom of R. nomadica damages swimmers. The effect of the hemolytic activity of the venom that depends on the concentration of venom and the type of blood cells varies in different species. We showed that RBCs of mice are more susceptible to lysis by the venom than human or sheep RBCs.