بررسي اثر مكمل كوآنزيم Q10 بر بيان ژن آپوپتوز و استرس اكسيداتيو پس از تزريق بوسولفان در موش صحرايي

Investigation of the Effect of Coenzyme Q10 Supplementation on Apoptosis Gene Expression and Oxidative Stress after Busulfan Injection in Rats

مقدمه: بوسولفان يك داروي شيمي درماني براي درمان سرطان بوده كه عوارضي را به واسطه راديكال‌هاي آزاد در اندام‌هاي مختلف از جمله دستگاه تناسلي ايجاد مي كند. حفظ سيستم توليدمثل و باروري با داروها و مكمل‌هاي آنتي‌اكسيدانتي در اين بيماران ضروري به نظر مي‌رسد. مواد و روش­ ها: از 32 قطعه موش صحرايي نر نژاد ويستار بالغ، در 4 گروه 8 تايي استفاده گرديد. براي گروه كنترل، حلال بوسولفان (شاملDMSO+PBS) به حجم 1/0 ميلي‌ليتر و براي گروه بوسولفان، به صورت تك دوز 10 ميلي‌گرم به ازاي كيلوگرم وزن به صورت داخل صفاقي تزريق شد. گروه درمان (بوسولفان+ كوآنزيمQ10) بميزان 10 ميلي‌گرم به ازاي كيلوگرم وزن روزانه در حجم 1/0 ميلي‌ليتر داخل صفاقي به مدت 35 روز دريافت كردند. همچنين گروه كنترل مثبت، فقط Q10 به ميزان گروه درماني دريافت نمودند. در پايان دوره، سرم حيوانات يراي اندازه‌گيري سنجش ظرفيت آنتي اكسيدانتي، پراكسيداسيون چربي‌ها و سوپراكسيدديسموتاز جمع‌آوري و پس از اندازه‌گيري نسبت وزن بيضه به بدن، بيضه ها دو قسمت شده و مورد ارزيابي بيان ژن‌هاي Bax, Bcl-2 و Caspase-3 و رنگ‌آميزي ايمنوهيستوشيمي قرار گرفتند. يافته ­ها: نتايج نشان داد در سرم موش‌هاي درمان شده با بوسولفان، استرس اكسيداتيو در طي 35 روز افزايش يافته و گروه دريافت كننده كوآنزيم Q10 توانسته است استرس اكسيداتيو را به صورت معني‌داري (p<0.005)كاهش دهد. ارزيابي RT-PCR نشان داد كه ميزان mRNA، Caspase 3 وBcl-2 در گروهي كه بوسولفان را به‌تنهايي دريافت كرده بود به طور چشمگيري (p<0.005) كاهش داشت. بحث و نتيجه­ گيري: استفاده از مكمل كوآنزيمQ10 مي‌تواند باعث تجديد فرآيند اسپرماتوژنز به واسطه كاهش استرس اكسيداتيو و تاثير بر روند آپوپتوز در موش‌هاي درمان شده با بوسولفان شود.

Background & Objectives: As a chemotherapy drug which is used for the treatment of cancer, busulfan causes certain complications in tissues, including the genital system, due to the existence of free radicals. Preserving the reproductive system and fertility with medications and antioxidant supplements seems necessary in these patients. Materials & Methods: Thirty-two male Wistar rats were used in 4 groups of 8. For the control group, the busulfan solution was injected (incl. DMSO + PBS) at a volume of 0.1 ml, and for the busulfan group, a single dose of 10 mg / kg was injected intraperitoneally. The Co.A Q10 group received 10 mg / kg of body weight daily (0.15 ml) by intraperitoneal injection for 35 days. At the end of the experiment, the serum of animals was collected in order to measure the antioxidant capacity, lipid peroxidation and superoxide dismutase. Moreover, after measuring the testicular to testicle ratio, the testicles were divided into two parts and evaluated for the expression of Bax, Bcl-2 and Caspase-3 genes, and immunohistochemical staining they got. Results: The results showed that oxidative stress increased in muscles treated by busulfan in 35 days, while it was significantly decreased in the Co.A Q10 receptor group by increasing antioxidant enzymes. RT-PCR evaluation showed that Caspase 3 and Bcl-2 mRNA levels were significantly reduced in the group receiving busulfan alone. Conclusion: The use of Co.A Q10 supplementation can lead to a renewal of spermatogenesis due to the reduction of oxidative stress and the effect on apoptosis in busulfan treated mice