كاربرد نشانگر ملكولي RAPD در بررسي تنوع ژنتيكي كفشدوزك Col.:Coccinellidae) Hippodamia variegata) در استان لرستان

The use of random amplified polymorphic DNA (RAPD) analysis for studies of genetic variation in populations of Hippodamia variegate (Col.:Coccinellidae) in Lorestan provinces, Iran

كفشدوزك (Col.:Coccinellidae) Goeze Hippodamia variegata يكي از شكارگرهاي مهم آفات در كشتزارهاي ايران است. اين شكارگر همه چيز خوار است و از شته­‌ها و پسيل­‌ها تغذيه مي­‌كند. ماركر RAPD نشانگر ژنتيكي مفيدي در بررسي تنوع ژنتيكي و چندشكلي در بين كفشدوزك­‌ها مي­‌باشد. اين تحقيق با هدف شناسايي و بررسي تنوع ژنتيكي جمعيت كفشدوزك Hippodamiavariegata در 9 جمعيت طبيعي و 2 جمعيت پرورش تجاري صورت پذيرفته است. براي بررسي تنوع ژنتيكي از 8 آغازگر10 نوكلئوتيدي تصادفي (C-15،C-16 ، C-18، C-19، BE-03، BE-09، B-01، B-06 ) استفاده گرديد. تمامي آغازگرها باندهاي واضح و تكرار­پذير ايجاد كردند. از 147 باند توليد شده 82 باند يعني55/78% باند چند شكل بودند. طول قطعات تكثير يافته در آغازگرها از 225 تا 20000 جفت باز متغير بود. دندروگرام بر اساس ضريب تشابه جاكارد به روش UPGMA رسم گرديد. نتايج حاصل از تجزيه خوشه­ اي، بيانگر وجود تفاوت ژنتيكي بالا در بين جمعيت­‌هاي مورد مطالعه در سطح استان لرستان بود. پرايمر BE-09 (باند 28) بالاترين و پرايمر C-16 (باند 13) كمترين تعداد باند را تشكيل دادند. به­ طوري­ كه تنها دو جمعيت دورود و خرم ­آباد آن هم با درصد بسيار كم (به­ ميزان 0/285 با ضريب جاكارد) نخستين خوشه را تشكيل مي­‌دادند و ساير خوشه­‌ها با درصد تشابه بسيار كم تشكيل شدند كه اين امر حاكي از مستعد بودن شرايط اكولوژي و جغرافيايي استان لرستان با وجود كوچك بودن سطح استان براي ايجاد و حفظ تنوع ژنتيكي در كفشدوزك­‌هاي استان مي­‌باشد.

Hippodamia variegata is one of the major predators of crop pests which feed an aphids and psyllids. RAPD is a useful genetically marker to determine polymorphism and relationship among LadyBirds species. The aim of this study was to identify and study the genetic diversity of Hippodamia variegata Goeze (Col.:Coccinellidae)in 9 natural populations and 2 commercial breeding populations. To investigate the genetic diversity of 8 primers, 10 randomized nucleotides (C-15, C-16, C-18, C-19, BE-03, BE-09, B-01, B-06) were used. All primers created clear and repeated bands. Of the 147 bands produced, 82 bands, 55.78 percent, were polymorphic. The length of amplified fragments by all primers varied from 225 to 2000 base pairs. The dendrogram was calculated based on the Jaccard similarity coefficient by UPGMA method. The results of cluster analysis indicated that there was a high genetic difference among the populations studied in Lorestan province. Primer BE- 09 (28 bands) produced the highest and primer C-16(13 bands) produced the lowest number of bands. Two populations Dorud and Kuhdasht formed the first cluster close to 0.28 Jaccard coefficient of using UPGMA method. Other clusters formed a very low percentage of similarity. This shows that the susceptibility of the ecology and geography of the province despite the small size establishes and maintains the genetic diversity in the province of the ladybirds. The results of cluster analysis indicated high genetic differences between populations studied in the Lorestan province.