جداسازي و كشت سلول هاي فيبروبلاست پوستي از نوزاد موش سوري به روشي ساده و ارزان

مقدمه كشت سلولي يكي از تكنيك هاي اصلي مورد استفاده در تحقيقات علمي امروز مي باشد كه به سه صورت انجام مي شود: كشت اوليه، كشت ثانويه يا پاساژ سلولي و خريدن سلول هاي ناميرا از بانك هاي سلولي. سلول فيبروبلاست يكي از اجزاي مهم بافت همبند مي باشد كه تقريبا در همه جاي بدن يافت مي شود. سلول هاي فيبروبلاست بر اساس موقعيت قرارگيري، نقش هاي عملكردي و مورفولوژي گوناگوني را دارا مي باشند. هدف ما در اين طرح ساده سازي از طريق نوآوري و بومي سازي، و به دست آوردن سلول هاي فيبروبلاست پوستي نوزاد موش به منظوراستفاده از اين سلول ها براي مطالعات بعدي بود. مواد و روش ها براي انجام اين پروژه از نوزاد موش يك تا دو روزه از نژاد سوري استفاده شد. قبل از شروع كار ابتدا تمام وسايل ازجمله ست جراحي و ظروف كشت و بافرها و ... توسط اتوكلاو در دماي 121 درجه سانتيگراد و فشارشديد استريل شدند، همچنين محيط كار توسط الكل 70% و لامپ UV استريل شدند. ابتدا نوزادهاي موش زير هود بيولوژي و با ابزار استريل در الكل 70 درصد كشته واستريل شدند و سپس سلول هاي فيبروبلاست پوستي از اين موش ها جدا شد. علاوه بر اين سلول هاي فيبروبلاست پوستي كشت داه شده جهت رشد بيشتر از محيط اوليه به يك محيط تازه و جديد منتقل شدند و اولين پاساژ سلولي بر روي اين سلول ها انجام شد. نتايج سلول هاي فيبروبلاست كشت داده شده در روزهاي مختلف از لحاظ ميزان رشد و مورفولوژي توسط ميكروسكوپ فلوئورسنت (Olympus) با بزرگنمايي 10 مورد بررسي قرار گرفتند، كه اين سلول ها از نظر مورفولوژي مناسب بودند. نتيجه گيري با توجه به نتايج مطالعه حاضر، سادگي اين روش، عدم نياز به صرف هزينه زياد و استريل بودن شرايط بدون استفاده از آنتي بيوتيك و ضد قارچ ،استفاده از اين روش براي جداسازي و كشت سلول ها در مطالعات مختلف را منطقي مي سازد.