بيوكنترل باكتري اشريشيا از طريق تثبيت باكتريوفاژ ليتيك اختصاصي آن بر فيلم زيست تخريب‌پذير استات سلولز در شرايط آزمايشگاهي

زمينه و هدف: باكتريوفاژها انگل هاي اجباري باكتريايي و بي خطر براي انسان و حيوان هستند كه با روش هاي غوطه وري يا اسپري به عنوان عوامل ضدميكروبي طبيعي در مواد غذايي به كار مي روند. استفاده از اين روش ها موجب هدررفتن و يا به دام افتادن فاژ در مواد غذايي مي شود؛ اما تثبيت آن بر سطح پليمر، تماس فاژ با سلول ميزبان در سطح مواد غذايي را تسهيل مي كند. لذا هدف اين مطالعه، تثبيت فاژ ليتيك اشريشيا بر فيلم استات سلولز و بررسي اثر ضدميكروبي آن بود.مواد و روش كار: باكتري اشريشيا به مدت ۲۴ ساعت در دماي ۳۷ درجۀ سلسيوس گرم خانه گذاري و اثر ضدميكروبي فاژها از طريق تشكيل پلاك ارزيابي شد. فيلم استات سلولز به روش قالب ريزي تهيه و سپس تحت تيمار پلاسما اصلاح و در سوسپانسيوني از محلول فاژ ( PFU/mL۱۰^۱۰) غوطه ور و به مدت ۲۴ ساعت با لرزش آرام در دماي ۳۷ درجۀ سلسيوس گرم خانه گذاري شد. سپس تعداد فاژهاي تثبيت شده تخمين زده شد. براي تأييد تثبيت فاژها، تصويربرداري FESEM انجام گرفت و اثر ضدميكروبي فيلم فعال با روش انتشار ديسك ارزيابي و ميزان انتشار و فعاليت ضدميكروبي فاژهاي تثبيت شده طي ۱۴ روز بررسي شد.يافته ها: فاژها پلاك هاي واضحي عليه باكتري اشريشيا تشكيل دادند. اصلاح فيلم از طريق پلاسما منجر به تثبيت يكنواخت PFU/mL ۱۰^۸ فاژ شد كه تصاوير FESEM آن را تأييد كرد. فيلم فعال (با قطر هالۀ ۱۲ ميلي متر) نسبت به آنتي بيوتيك آمپي سيلين (نمونه كنترل مثبت با قطر هالۀ ۸ ميلي متر) اثر ضدميكروبي قوي تري داشت. پس از گذشت ۱۱ روز، تعداد فاژهاي تثبيت شده از ۱۰^۸ به ۱۰^۶ (PFU/ml) كاهش و از سطح فيلم انتشار يافتند و پس از آن انتشاري صورت نگرفت. فعاليت ضدميكروبي فيلم فعال طي ۱۵ روز، به علت حضورنداشتن مداوم باكتري ميزبان كاهش يافت؛ به نحوي كه جمعيت باكتري ميزبان از ۳ به LOG CFU/mL 5/3 افزايش يافت.نتيجه گيري: علي رغم كاهش فعاليت ضدميكروبي فيلم فعال استات سلولز طي زمان، به علت حضور باكتري ميزبان در سطح مواد غذايي و پتانسيل بالاي فيلم فعال در نابودي باكتري ميزبان، مي توان از آن به منظور افزايش ايمني غذا در بسته بندي مواد غذايي استفاده كرد.