بررسي مولكولي و آناليز بيوانفورماتيكي دو جهش شايع ژن فنيل‌آلانين هيدروكسيلاز(PAH) با روش HRM

سابقه و هدف: بيماري فنيل كتونوري شايع ترين خطاي مادرزادي متابوليسم آمينواسيد در جهان است و نرخ بروز آن در ايران در حال افزايش است. هدف از مطالعه حاضر، بررسي كارايي روش HRM به عنوان روشي سريع و مناسب در شناسايي جهش هاي شايع ژن فنيل آلانين هيدروكسيلاز منجمله IVS1011G A و P281L مي باشد، تا با كمك به تشخيص زود هنگام اين بيماري بتوان از بروز علائم آن جلوگيري كرد. مواد و روش ها: در اين مطالعه موردشاهدي 20 نمونه DNA شامل يك نمونه حاوي جهش IVS10-11G A و يك نمونه حاوي جهش P281L و 18 نمونه كنترل فاقد بيماري PKU كه از خون محيطي استخراج شده و از مركز ژنتيك پزشكي اصفهان جمع آوري شدند با روش HRM در دستگاه Real time PCR تعيين ژنوتيپ گرديدند. جهت تاييد جهش ها، نمونه هاي جهش يافته با روش توالي يابي تعيين ژنوتيپ شدند. مطالعه بيوانفورماتيكي براي تعيين اثرات ساختاري و عملكردي جهش P281L بر پروتئين PAH استفاده شد. يافته ها: روش HRM جهش هاي IVS10-11G A و P281L را با اختصاصيت و حساسيت 100% شناسايي كرد و نمونه هاي جهش يافته و كنترل در نمودارهاي طبيعي سازي و تمايز به راحتي از هم قابل تفكيك و تمايز بودند. مطالعات بيوانفورماتيكي اثرات ناپايداري و بيماري زا بودن پروتئين PAH حاوي جهش P281L را نشان دادند. نتيجه گيري: نتايج مطالعه نشان داد كه روش HRM روشي ساده و سريع است و با اختصاصيت و حساسيت 100% توانست دو جهش IVS10-11G A و P281L را شناسايي كند.