توليد پروتئين نوتركيب سياليداز-كمپ و تهيه نانوذرات كايتوزان حامل آن به منظور استفاده بعنوان كانديداي واكسن پروپيوني باكتريوم آكنه

سابقه و هدف: آكنه ولگاريس يكي از شايع ترين بيماري هاي پوستي است كه فشار روحي زياد و هزينه بالايي براي بيماران دارد. درمان هاي موجود كارايي پاييني داشته و شامل آنتي بيوتيك ها و داروهاي ضدالتهابي هستند كه با توجه به ماهيت مزمن بيماري بويژه در سنين جواني، عوارض زيادي از جمله مقاومت آنتي بيوتيكي و واكنش هاي آلرژيك دارند. به همين دليل يكي از رويكردهاي جديد درماني، استفاده از واكسن درماني با كمك خود باكتري و يا اجزاي آن است. هدف از اين مطالعه توليد نانوذرات حامل پروتئين نوتركيب CAMP-Sialidase به عنوان يك آنتي ژن كايمريك جديد براي استفاده در واكسن درماني بيماري اكنه مي باشد. مواد و روش ها: جهت بيان پروتئين نوتركيب CAMP-Sialidase از ميزبان E. coli BL21 DE3 استفاده شد. تخليص پروتئين به روش تركيبي اورهايميدازول و با استفاده از ستون نيكلنيتريلو استيك اسيد انجام شد. پروتئين نوتركيب با روش وسترن بلاتينگ با آنتي بادي ضد هيستيدين مورد تاييد قرار گرفت. سپس نانوذرات بارگذاري شده با پروتئين نوتركيب به روش ژلاسيون يوني كايتوزان با تري پلي فسفات تهيه شدند. در نهايت اندازه و پتانسيل زتاي نانوذرات با دستگاه DLS تعيين گرديد. يافته ها: پس از بيان و تخليص، پروتئين نوتركيب CAMP-Sialidase مورد تاييد قرار گرفت. اندازه و پتاسيل زتاي نانوذرات حاوي پروتئين نوتركيب CAMP-Sialidase با غلظت 0/6 ميلي گرم بر ميلي ليتر از طريق دستگاه DLS بترتيب 80 نانومتر و 27+ ميلي ولت تعيين گرديد. ميزان بارگذاري پروتئين در نانوذرات 88 درصد تعيين شد. نتيجه گيري: نتايج نشان مي دهد كه پروتئين نوتركيب بصورت كاملا سالم بيان شده و بطور موفقيت آميزي در داخل نانوذرات كايتوزان كپسوله شده است.