بررسي ارتباط بين پلي مورفيزم تك نوكلئوتيدي (SNP) در ژن (TLR5m) receptor like-Toll با نحوه پاسخ دهي ايمني قزل‌آلاي رنگين‌كمان (Oncorhynchus mykiss) در برابر باكتري Aeromonas هيدروفيلا (Aeromonas hydrophila)

Correlation between SNPs in Toll-like receptor5 membrane form (TLR5m) gene and immune respond in Rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) exposed to Aeromonas hydrophila

تي ال آر5 ام (TLR5m) يكي از اعضاي خانواده پروتئين­هاي گيرنده ­هاي تول شكل است كه در سيستم ايمني، فلاژلين موجود در ساختار اندام تحركي بسياري از پاتوژن­ها را تشخيص داده و منجر به فعالسازي ايمني اوليه و اكتسابي مي­شود. وجود چندشكلي تك نوكلئوتيدي (SNP) در اين ژن در افراد مختلف مي­تواند منجر به تفاوت در نحوه پاسخ دهي ايمني به پاتوژن‌ها گردد. در اين مطالعه بخشي از ژن تي ال آر 5 ام ماهي قزل‌آلاي رنگين‌كمان (Oncorhynchus mykiss) با استفاده از روش واكنش زنجيره­ايي پليمراز و توالي­يابي و انطباق توالي­ها مورد بررسي قرار گرفت و شش چند شكلي شامل سه تفاوت تك نوكلئوتيدي (2412 T/A)، (2415 T/A)، (2385 G/A) و سه چندشكلي حذف و اضافه (حذف/اضافه C،C/T 2091)، (حذف/اضافه T 2566)، (حذف/اضافه C 2102) در توالي اين ژن شناسايي شد. براي بررسي ارتباط بين اين چندشكلي­ها با نحوه پاسخ دهي ايمني در ماهي قزل‌آلاي رنگين‌كمان، چالش با باكتري Aeromonas هيدروفيلا (Aeromonas hydrophila) بصورت درون صفاقي ترتيب داده شد و پارامترهاي خوني شامل ميزان فعاليت جزء سي سيستم كمپلمان، ميزان ليزوزيم، ميزان هماتوكريت، هموگلوبين، ام­سي­اچ­سي (MCHC)، ام­سي­وي (MCV) و ام­سي­اچ­سي (MCHC) مورد اندازه گيري قرار گرفت. نتايج حاصل از بررسي ارتباط بين پارامترهاي خوني و چندشكلي­هاي شناسايي شده نشان دادكه وجود دو چندشكلي (حذف/اضافه C،C/T 2091) و (حذف/اضافه T 2566) با ميزان بالاتر فعاليت جزء سي كمپلمان در افراد مورد آزمون، همبستگي معنادار نشان مي­دهد. با توجه به نتايج بدست آمده مي­توان پيشنهاد داد كه چندشكلي (حذف/اضافه C،C/T 2091) و نيزحذف/اضافه T 2566 مي­توانند بعنوان نشانگر­هاي ژنتيكي در انتخاب مولدين مقاوم در برابر باكتري Aeromonas، در برنامه­هاي به گزيني مولدين، بكار روند .

Toll-like receptors (TLRs) generally are involved in host immune responses against microbial invasions. Mono meric felagellin, the structure component of bacterial felagella is the agonist of TLR5m. After binding to felagellin, TLR5m initiates specific signal transduction pathways and triggers immune responses. Single nucleotide polymorphisms (SNPs) in this gene regulate inflammatory pathways and are associated with susceptibility/resistance to infection. In this study using polymerase chain reaction, sequencing and aligning the sequences, we investigated TLR5m gene of Rainbow Trout (Oncorhynchus mykiss) and identified 6 polymorphisms consist in 3 SNPs: (2412, T/A), (2415,T/A) and (2385, G/A) and 3 insert/deletion: (inser/dele. C, C/T, 2091), (inser/dele. T, 2566) and (inser/dele. C, 2102). A bacterial challenge was performed to explore their association with humoral immune responses such as lysozym content and complement activity levels in serum. The results show that polymorphisms (inser/dele. C, C/T, 2091) and (inserldele. T, 2566) were significantly correlated with higher complement activity levels (p<0.05).These results suggested that these 2 polymorphisms could be potential markers applied in future selection of Rainbow Trout with enhanced resistance to Aeromonas hydrophila.