بهينه‌سازي كدون ژن فاكتور سلول‌هاي بنيادي (SCF) و ارزيابي بيان اين ژن با كمك وكتور pBudCE4.1 در سلول‌هاي تخمدان همستر چيني (CHO)

زمينه و هدف: فاكتور سلول بنيادي (SCF) يك سايتوكاين خوني است كه مي تواند از طريق تأثير بر روي سلول هاي مولد خون ساز در تمايز سلول هاي پيش ساز خوني، بقاء، تكثير و تمايز ماست سل ها و همچنين افزايش تكثير و تهاجم سلول هاي توموري بااهميت باشد و نقش درماني آن در بهبود بيماري هايي نظير آلزايمر و سكته هاي قلبي در حال بررسي و تحقيق است. هدف از اين تحقيق كلون سازي ژن SCF به وسيله حامل بياني pBudCE4.1 با بهينه سازي كدون در سلول هاي تخمدان همستر چيني (CHO) بود. مواد و روش ها: در اين مطالعه تجربي توالي SCF بعد از بهينه سازي كدون براي سلول هاي CHO و تغيير دادن محتوي G+C به ميزان بهينه به صورت سنتتيك ساخته شد و در وكتور بياني pBudCE4.1 ساب كلون شد. سپس ژن SCF به همراه پلاسميد موردنظر به درون سلول هاي CHOK1 ترانسفكت شد و با استفاده از RT qPCR ميزان بيان ارزيابي گرديد. نتايج: حامل بياني نوتركيب pBudCE4.1/SCF ساخته شد و با تكنيك PCR، هضم آنزيمي و تعيين توالي مورد تائيد قرار گرفت. نتايج RT qPCR نشان داد كه ژن SCF پس از بهينه سازي كدون در سلول هاي CHO مي تواند بيان شود. نتيجه گيري: نتايج نشان داد كه به خوبي مي توان نسبت به همسانه سازي ژن SCF از طريق حامل بياني pBudCE4.1 اقدام كرد و اين حامل بياني مي تواند يك حامل مناسب براي بيان ژن SCF در سلول هاي CHO باشد.