بررسي فراواني استافيلوكوك هاي مقاوم به متي سيلين در ميان بيماران برخي بيمارستان هاي رشت به روش فنوتيپي و مولكولي

Studing the frequency of methicillin-resistant staphylococci by phenotypic and molecular methods among patients in some hospitals of Rasht

اﻣﺮوزه اﺳﺘﺎﻓﯿﻠﻮﮐﻮﮐﻮس اورﺋﻮس ﻣﻘﺎوم ﺑﻪ ﻣﺘﯽ­سيلين (MRSA) ﺑﻪ­دﻟﯿﻞ ﻣﻘﺎوﻣﺖ ﺑﻪ­ﻋﻮاﻣﻞ و داروﻫﺎي ﺿﺪﻣﯿﮑﺮوﺑﯽ به يﮑﯽ از ﻧﮕﺮاﻧﯽ­ﻫﺎي ﻋﻤﺪه ﺳﻼﻣﺖ ﻋﻤﻮﻣﯽ ﺗﺒﺪيﻞ ﺷﺪه است. هدف از اﻳـﻦ ﺗﺤﻘﻴـﻖ تعيين جدايه­ هاي MRSA با روش مولكولي و انتشار ديسك و تعيين الگوي مقاومت آنتي­بيوتيكي آن­ها در بيماران برخي از بيمارستان­هاي رشت است. مواد و روش­ها: اين مطالعه مقطعي- توصيفي از فروردين ماه لغايت شهريور ماه 1395 انجام شد. 76 جدايه باليني استافيلوكوك از برخي بيمارستان­هاي رشت جمع ­آوري شد و با انجام آزمايش­هاي بيوشيميايي مختلف گونه استافيلوكوك اورئوس شناسايي گرديد. پس از تعيين هويت سويه­ هاي MRSA به روش انتشار ديسك ، بررسي الگوي مقاومت آنتي بيوتيكي جدايه­ ها با روش انتشار ديسك با استفاده از 6 نوع آنتي بيوتيك، بر اساس پروتكل مؤسسه استاندارد آزمايشگاهي و باليني (CLSI) صورت گرفت. سپس حضور ژن mecA در سويه ­هاي مقاوم به متي­سيلين با روش واكنش زنجيره­اي پلي­مراز (PCR) بررسي شد و نمونه­ هاي داراي ژن mecA تعيين توالي گرديد. نتايج با استفاده از نرم­ افزار23 SPSS مورد تجزيه و تحليل آماري قرار گرفت. يافته­ها: نتايج اين مطالعه نشان داد كه از 76 جدايه استافيلوكوك، 69 (8/90 %) جدايه، استافيلوكوكوس اورئوس بود. فراواني سويه­ هاي مقاوم به متي­سيلين در روش انتشار از ديسك 71 % و در روش PCR 3/62% بود. بيش­ترين حساسيت آنتي­بيوتيكي جدايه­ ها نسبت به جنتامايسين (46/72 %) و بيش­ترين مقاومت نسبت به باسيتراسين (6/82 %) تعيين شد. تفاوت معني­داري بين جدايه ­هاي MRSA و نوع نمونه مشاهده نشد (P>0.05). نتيجه­ گيري: ﻧﺘﺎيج ﻧﺸﺎن داد كه ميزان حضور سويه ­هاي اﺳﺘﺎﻓﯿﻠﻮﮐﻮﮐﻮس اورﺋﻮس مقاوم به متي­سيلين در نمونه­ هاي بيمارستاني رشت قابل توجه است كه مي­تواند به ­دليل استفاده بيش از حد از آنتي­ بيوتيك­ ها به ­منظور درمان بيماري­ها باشد.

Aim and Background: Meticillin resistant Staphylococcus aureus (MRSA) has become one of the major public-health concerns in recent years due to resistance to antimicrobial drugs and agents. This Study aims to diagnose of MRSA isolates by molecular and phenotypic methods and to detect of the antibiotic resistance pattern in MRSA strains in clinical patient samples in Rasht. Material and Methods: This cross-sectional (descriptive-analytical) study was conducted from April to September 2016. 76 isolates of Staphylococcus were collected from some hospitals in Rasht and was characterized by varius biochemical tests of Staphylococcus aureus species. A disc diffusion method was performed to identify MRSA strains. The antibiotic resistance pattern of isolates was done using disc diffusion method against six antibiotics based on Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) protocol. Then, Polymerase Chain Reaction (PCR) was performed with specific primers to mecA gene. Also, sequencing was done in mecA positive PCR products. Data were analyzed using SPSS 23 software. Results : The results of this study, showed that 69 (90.8%) out of 76 isolates of Staphylococcus were S.aureus. The rate of MRSA strains in the phenotypic(disk diffusion) and PCR methods were 71% and 62.3%, respectively. The S. aureus isolates exhibited the most sensitivity and resistance to gentamicin(72.46%) and bacitracin(82.6%), respectively. No significant correlation was found between MRSA isolates and type of sample(P>0.05). Conclusion: The findings showed that the presence of MRSA strains were remarkable in the hospital samples in Rasht because of the overuse of antibiotics for the treatment of diseases.