مطالعه و شناسايي جهش در ژن ERG11 كانديدا آلبيكنس مقاوم به دارو و ارتباط آن با ناباروري زنان ايراني

Study and detection of ERG11 gene mutation in resistant - drug Candida albicans and relation with Iranian women infertility

سابقه و هدف: كانديدا آلبيكنس مهم­ترين دليل ولوواژينال كانديديازيس است و مقاومت به آزول­ها با مكانيسم­ هايي هم­چون تغيير در ژنERG11 مي­تواند در اين پاتوژن رخ دهد. هدف از اين مطالعه بررسي جهش در ژن ERG11 كانديدا آلبيكنس مقاوم ­به دارو در بيماران مبتلا به واژينيت كانديديايي و ارتباط آن با ناباروري در زنان ايراني بود. مواد و روش­ها : با نمونه­ گيري واژينال از تعداد 100 بيمار گونه­ هاي كانديدا البيكانس با استفاده از روش كشت بر روي محيط كروم آگار جداسازي شدند. حساسيت دارويي بر اساس روش استاندارد انتشار ديسك تعيين شد. سپس ژنوم نمونه­ هاي مقاوم استخراج شد و با انجام PCR و تعيين توالي جهش در ژن ERG11 مشخص شد. جهت بررسي تغيير خصوصيت­هاي اسپرم و ارتباط با ناباروري، نمونه اسپرم نرمال با كانديدا آلبيكانس حساس و مقاوم در غلظت و زمان­هاي مختلف مجاورت داده شد. يافته ­ها: از 100 نمونه بيمار، 40 نمونه كانديدا آلبيكنس جداسازي شد كه 2 مورد مقاوم به فلوكونازول و كتوكونازول بودند. در اين 2 مورد جهش ژن ERG11از نوع تبديلي و افزايشي بود. در غلظت­هاي CFU/ml100000 و 10000 ، مدت زمان 4 ساعت و با 3 بار تكرار، در ميزان چسبندگي و تحرك اسپرم­ها كاهش معني­داري مشاهده شد (P<0.05). نتيجه­ گيري: نتايج نشان داد مقاومت به دارو مي­تواند با جهش در ژن ERG11 در كانديدا البيكانس افزايش يابد و اين عفونت­هاي واژينيت كانديديايي مي­تواند با ايجاد ناباروري در زنان ارتباط داشته باشد.

Aim and Background: Candida Albicans is the most important cause of vulvovaginal candidiasis and resistance to azoles can occur via various mechanisms including, change in the ERG11 gene. This study aim was to identification of ERG11 gene mutations in drug resistant Candida albicans isolated from patients with Candida vaginitis and its association with infertility in Iranian women. Material and methods: From 100 patients with vaginitis Candida Albicans species were isolated by using chromogen agar culture . The drug sensitivity was determined with standard protocol, diffusion disc test. Then extraction genome from resistance species and was used PCR and sequencing for investigation of ERG11 gene mutations. For detection of sperm parameters disorders and relation with infertility, normal sperm was placed adjacent to sensitive and resistance Candida Albicans by different concentrations and times. Results: From 100 patients, 40 samples of Candida albicans were isolated that 2 samples were fluconazole and ketoconazole-resistant. ERG11 gene mutations e in 2 samples were, conversion and insertion. In 10000 and 100000 CFU/ml concentrations, 4 hours and with 3 repeated, was observed significant relation to agglutination and reduction in motility of the sperms (P<0.05). Conclusion: This study results showed that antibiotic resistance can be increased in Candida albicans with mutation in the ERG11 gene and this Candida vaginitis infections, can associated with infertility in women.