بررسي بيان ژن هاي CXCL8 ، CCL4 ، CCL3 در نوتروفيل هاي مواجهه يافته با انگل ليشمانيا اينفانتوم در محيط كشت سلولي

زمينه و هدف: مطالعات مختلف نشان مي‌دهند كه نوتروفيل‌ها در اثر محرك‌هاي انگلي مي‌توانند كموكاين‌هاي مختلف توليد كنند. اين كموكاين‌ها باعث فراخواني لوكوسيت‌ها، لنفوسيت‌هاي T، سلول‌هاي دندريتيكي، مونوسيت‌ها، سلول‌هاي كشنده طبيعي و نوتروفيل‌ها به محل عفونت مي‌شوند. هدف از اين مطالعه بررسي بيان ژن‌هاي  CXCL8، CCL4، CCL3 در نوتروفيل‌هاي مواجهه يافته با انگل ليشمانيا اينفانتوم مي‌باشد. روش كار: طي اين مطالعه تجربيآزمايشگاهي از 30 فرد سالم خونگيري شد و نوتروفيل‌هاي خون محيطي با استفاده از روش هيستوپاك 1077، دكستران و سانتريفيوژ جدا شدند. پس از انجام آزمون تعيين درصد زنده بودن و خلوص، سلول‌ها شمارش شدند. سپس اين سلول‌ها با اشكال پروماستيگوت انگل ليشمانيا اينفانتوم كه از بخش ايمونولوژي انستيتو پاستور تهيه شده بود، در فاز ايستا مجاور شد و در انكوباتور CO2 به مدت يك ساعت انكوبه شد، نوتروفيل‌هاي تحريك نشده به عنوان شاهد استفاده شدند. پس از استخراج RNA، RNA توسط مجموعه آنزيمي به cDNA تبديل شد. از cDNA براي انجام Real Time PCR استفاده شد. ژن‌هاي انتخاب شده، ژن كموكاين‌هاي CCL3، CCL4، CXCL8 بوده و از β –Actin هم به عنوان ژن رفرانس استفاده شد و سپس توسط روش آماري ANOVA تغيير بيان ژن ها بررسي شد. يافته‌ها: نتايج اين تحقيق نشان دادند كه بيان ژن CXCL8 در نوتروفيل‌هاي مواجهه يافته با انگل ليشمانيا دچار افزايش معنا دار نسبت به نوتروفيل‌هاي شاهد گرديد (0.001 p). از سويي بيان ژن‌هاي CCL3 و CCL4 در نوتروفيل‌هاي مواجهه با انگل ليشمانيا نسبت به نوتروفيل‌هاي شاهد بيانگر تغيير معنا‌داري نگرديد. نتيجه‌گيري: نتايج اين مطالعه نشان مي‌دهد كه مواجهه با انگل ليشمانيا سبب تغييري در بيان mRNA ژن‌هاي CCL3,CCL4 در ميان نوتروفيل‌هاي تحريك شده مشاهده نگرديد اما باعث افزايش بيان بالايي از CXCL8 گرديد. بر اين مبنا، اندازه‌گيري بيان ژن CXCL8 مي‌تواند به عنوان معياري جهت تشخيص ابتلا به انگل ليشمانيا مطرح باشد.