بررسي ميزان بيان ژن Cbfa1 طي تمايز استئوژنيك سلول‌هاي بنيادي مشتق از بافت چربي

مقدمه: بافت استخوان توانايي رشد و ترميم را دارا مي باشد، اما اين توانايي با افزايش وسعت صدمات استخوان محدود مي شود. تاكنون، روش هاي جايگزيني موجود هر يك داراي معايبي بوده است. به تازگي، سلول هاي بنيادي مزانشيمي به خاطر كاربرد در مهندسي بافت استخوان از اهميت بالايي برخوردار شده اند. اين سلول ها توانايي تمايز به استئوبلاست سلول هاي اصلي استخوان را دارا مي باشند. ژن Cbfa1 (Core binding factor alpha 1) يكي از اصلي ترين ژن هاي دخيل در استخوان زايي است. در اين مطالعه، به بررسي روند بيان ژن Cbfa1 طي دوره ي تمايزي استئوژنيك پرداختيم تا اثر تغييرات آن را روي تمايز اين سلول ها تعيين كنيم. روش ها: پس از نمونه گيري و جداسازي سلول هاي بنيادي مزانشيمي از بافت چربي، كشت اين سلول ها انجام شد. پس از پاساژ سوم، تمايز استئوژنيك اين سلول ها به انجام رسيد و سلول ها به مدت 7، 14، 21 و 28 روز در محيط تمايزي كشت داده شدند. تصديق تمايز با استفاده از رنگ آميزي von Kossa صورت پذيرفت. پس از به دست آوردن سلول ها، تخليص RNA تام سلولي و ساخت cDNA، با استفاده از روش Real-time PCR، ميزان بيان ژن Cbfa1 در استئوبلاست هاي حاصل از تمايز استئوژنيك مشخص گرديد. يافته ها: افزايش قابل توجهي در بيان ژن Cbfa1 در طي دوره ي تمايزي از روز 7 تا روز 28 در استئوبلاست هاي تمايز يافته از سلول هاي بنيادي مزانشيمي ديده شد. نتيجه گيري: به نظر مي رسد، با بيشتر قرار گرفتن سلول هاي بنيادي مزانشيمي در محيط استئوژنيك، اين سلول ها شباهت بيشتري به سلول هاي استئوبلاست طبيعي از نظر بيان ژن Cbfa1 پيدا خواهند كرد؛ هر چند، اين ميزان بيان كمتر از بيان ژن Cbfa1 در استئوبلاست هاي طبيعي مي باشد