جدا سازي و خالص ‌سازي يك باكتريوسين مقاوم به اشعه‌ي ماوراي بنفش از سويه‌يDSH20 انتروكوك فاسيوم داراي اثر ضد باكتري ليستريا منوسيتوژنز

مقدمه: علاوه بر مطرح بودن باكتريوسين ها به عنوان جايگزين آنتي بيوتيك هاي مرسوم، كاربرد رايج آن ها به عنوان ماده ي نگه دارنده و محافظ در صنايع غذايي است. هدف از اين مطالعه، جدا سازي و خالص سازي باكتريوسين هاي مقاوم به اشعه ي ماوراي بنفش (Ultraviolet يا UV) از سويه هاي انتروكوك بود كه بر ضد باكتري ليستريا منوسيتوژنز فعال باشند. روش ها: سويه هاي باكتري انتروكوك از نمونه هاي مختلف باليني جدا سازي و شناسايي شدند و توليد باكتريوسين در آن ها عليه سويه هاي باكتري ليستريا منوسيتوژنز مورد بررسي قرار گرفت. يك ايزوله ي باكتري انتروكوك، كه داراي توليد قابل ملاحظه ي باكتريوسين بر عليه همگي سويه هاي ليستريا منوسيتوژنز مورد مطالعه بود، به روش فنوتيپي و بيوشيميايي و نيز روش ملكولي 16SrRNA مورد شناسايي قرار گرفت و در سايت NCBI (National Center for Biotechnology Information) ثبت گرديد. در مرحله ي بعد، اين باكتريوسين خالص سازي شد و اثرات آنزيم هاي مختلف پروتئوليتيك و نيز تيمارهاي pH، حرارت و اشعه ي ماوراي بنفش بر روي آن مورد بررسي قرار گرفت؛ وزن ملكولي آن نيز به روش SDS-PAGE مشخص گرديد. يافته ها: از 70 سويه ي مختلف انتروكوك جدا سازي شده، 5 ايزوله ي انتروكوك داراي اثر مهاري بر عليه سويه هاي ليستريا منوسيتوژنز بود كه از اين ميان، يك ايزوله بر ضد هر چهار سويه ي ليستريا منوسيتوژنز مورد مطالعه، داراي اثر مهاري بود. بر اساس نتايج تعيين توالي 16SrRNA اين ايزوله، مشخص شد كه اين باكتري، يك سويه از انتروكوك فاسيوم بود كه به نام DSH20 و با شماره ي دسترسي JX567733.1در سايت NCBI به ثبت رسيد. آنزيم هاي پروتئوليتيك استفاده شده باعث از بين رفتن فعاليت ضدميكروبي باكتريوسين گرديد كه تاييدي بر پروتئيني بودن اين تركيب بود. باكتريوسين توليدي به اثر درجه ي حرارت بالا، تغييرات pH و اشعه ي ماوراي بنفش مقاوم بود. وزن ملكولي باكتريوسين جدا سازي شده به روش SDS-PAGE در حدود 35 كيلودالتون تخمين زده شد. نتيجه گيري: خصوصيات بيوشيميايي باكتريوسين مورد مطالعه از قبيل پايداري حرارتي، مقاومت به اشعه ي ماوراي بنفش و pH بسيار قابل توجه بود. توانايي بالقوه ي اين باكتريوسين، آن را به عنوان تركيب ضد ميكروبي جايگزين عليه ليستريا منوسيتوژنز و نيز نگه دارنده ي غذاهاي تخميري مطرح مي سازد.