ارزيابي تكنيك مولكولي تكثير هم‌دما به واسطه‌ي حلقه در تشخيص كراتيت‌هاي آدنوويروس

مقدمه: آدنوويروس‌ها از مهم‌ترين عوامل ايجاد عفونت‌هاي چشم مي‌باشند. شناسايي سريع و به موقع كراتيت آدنوويروسي براي درمان مناسب و جلوگيري از گسترش بيماري از مسايل عمده در تشخيص اين ويروس است. روش‌هاي تشخيص اين ويروس داراي محدوديت‌هايي هستند و امكان استفاده از آن‌ها به راحتي و در همه‌ي مراكز تشخيصي وجود ندارد. در اين تحقيق با كمك تكنيك مولكولي تكثير هم‌دما به واسطه‌ي حلقه (LAMP يا Loop mediated isothermal amplification)، اين ويروس در بيماران با دقت، سرعت و سهولت بيشتري تشخيص داده شد. روش‌ها: پژوهش حاضر يك مطالعه‌ي توصيفي- مقطعي بود كه در سال 1391 بر روي 86 بيمار مشكوك به كراتيت آدنوويروسي مراجعه كننده به بيمارستان فارابي و لبافي‌نژاد تهران انجام شد. DNA نمونه‌هاي بيماران به روش Boiling و DNG-Plus استخراج شد. پرايمرهاي ويژه براي تكنيك LAMP به وسيله‌ي نرم‌افزار Primer explorer نسخه‌ي 4 طراحي گرديد. آزمون‌هاي حساسيت و ويژگي براي تست LAMP انجام شد و سپس بر روي نمونه‌ها بهينه گرديد و محصول LAMP به وسيله‌ي اضافه كردن سايبرگرين، بررسي شد. يافته‌ها: تست LAMP بر اساس پلاسميد حاوي كل ژنوم آدنوويروس اپتيمايز گرديد. حساسيت تست در حد يك پارتيكل ويروس ارزيابي شد و هيچ واكنش مثبتي با ساير عوامل در تست ويژگي، ايجاد نشد. از 86 نمونه‌ي مشكوك به كراتيت آدنوويروسي، 28 نمونه (32 درصد) در تست مثبت شدند. نتيجه‌گيري: استفاده از تكنيك مولكولي LAMP در اين تحقيق براي تشخيص كراتيت آدنوويروسي نشان داد كه اين تكنيك، داراي حساسيت و دقت بالايي مي‌باشد و روشي سريع و قابل اعتماد براي تشخيص عفونت‌هايي مانند كراتيت، كه براي درمان رضايت‌بخش نيازمند تشخيص سريع است، مي‌باشد.