جداسازي Sarcocystis hirsuta از همبرگر سنتي توليدي در ايران

مقدمه: ساركوسيستوزيز از شايع‌ترين بيماري‌هاي زئونوز محسوب مي‌شود كه توسط انگل‌هاي جنس Sarcocystis ايجاد مي‌گردد. Sarcocystis تك ياخته‌ي درون سلولي دو ميزبانه و شاخه‌ي اپي كمپلكسا مي‌باشد. سه گونه‌ي شناخته شده‌ي Sarcocystis، گاو را به عنوان ميزبان واسط آلوده مي‌نمايد كه شامل Sarcocystis cruzi، Sarcocystis hirsuta و Sarcocystis hominis مي‌باشند و سگ، گربه و انسان به ترتيب ميزبانان نهايي هستند. روش‌ها: يك نمونه‌ي همبرگر سنتي عرضه شده در شهر يزد خريداري و به آزمايشگاه منتقل شد. جهت انجام استخراج DNA ژنومي، از روش Salting out استفاده شد. جهت شناسايي انگل جنس ساركوسيست و با استفاده از پرايمرهاي اختصاصي، قطعه‌اي خاص از ژن (s rRNA18 يا S ribosomal RNA18) اين انگل تكثير شد كه نتيجه‌ي حاصل از الكتروفورز، باند bp 953 را نشان داد كه بيانگر جنس Sarcocystis بود. سپس به منظور تعيين گونه‌ي انگل، از آنزيم‌هاي BfaI و RsaI جهت ايجاد برش بر قطعه‌ي تكثير شده استفاده گرديد و باندهاي حاصل از برش آنزيم‌ها، بر روي ژل آگارز الكتروفورز شدند. يافته‌ها: پس از برش با آنزيم BfaI دو باند به اندازه‌ي bp 397 و bp 557 مشاهده شد. بعد از ايجاد برش توسط آنزيم RsaI، دو باند bp 376 و bp 577 مشاهده شد كه دليل بر وجود گونه‌ي Sarcocystis hirsuta مي‌باشد. نتيجه‌گيري: در اين گزارش، وجود Sarcocystis hirsuta در همبرگر سنتي را مي‌توان به تماس نزديك گربه با دام در مزارع كه سبب آلودگي آب و غذاي دام به مدفوع آلوده‌ي گربه مي‌شود، نسبت داد. بر اساس جستجو در منابع پايگاه‌هاي اطلاعات علمي، اين تحقيق اولين گزارش تشخيص مولكولي Sarcocystis hirsuta به روش PCR-RFLP Polymerase chain reaction- restriction fragment length polymorphism)) در همبرگرهاي سنتي توليدي در ايران بود.