بررسي اثر عصاره الكلي گياه سياه دانه (Nigella sativa L) بر القاي مرگ برنامه ريزي شده در سلول‌هاي سرطاني رده HL-60

Comparison of anti-inflammatory effects of dexamethasone and thiamine on Wallerian degeneration after sciatic nerve transection in rat

هدف: هدف از اين مطالعه بررسي اثر آپوپتوتيك عصاره الكلي سياهدانه بر روي سلول‌هاي سرطاني HL-60 بود.. مواد و روش ها: دراين مطالعه تجربي غلظت هاي 350، 650، 950 و 1250 ميكروگرم/ميلي ليتر عصاره الكلي سياه دانه در محيط كشت، روي سلول‌هاي سرطاني HL-60 به مدت 24 ساعت اثر داده شد. براي بررسي درصد سلول‌هاي زنده از آزمون MTT استفاده شد. همچنين براي تعيين اينكه آيا عصاره الكلي سياه دانه تكثير سلول هاي HL-60 را از طريق تنظيم پيشرفت چرخه سلولي و آپوپتوزيس مهار مي‌كند، ابتدا با استفاده از رنگ آميزي PI فلوسايتومتري انجام شد، سپس رنگ آميزي AO/EB سلول هاي HL-60 براي تشخيص الگوهاي آپوپتوزيس و نكروزيس انجام شد. نتايج: آزمون MTT نشان داد كه در مقايسه با گروه كنترل، عصاره الكلي سياه دانه در غلظت 650 ميكروگرم/ميلي ليتر باعث مرگ 50 درصد سلول‌هاي HL-60 شد و در غلظت‌هاي بالاتر وابسته به غلظت باعث مرگ بيشتر سلول‌ها شد، همچنين افزايش معنيداري در سلول‌هاي فاز G0/G1 از 15/2 درصد در گروه كنترل به 51/65 درصد در گروه تيمار شده با غلظت 650 ميكروگرم/ميلي ليتر باعث مشاهده شد. به علاوه مشخص شد كه غلظت 650 ميكروگرم/ميلي ليتر باعث القا آپوپتوزيس در سلول هاي HL-60 شد در حالي كه در غلظت‌هاي بالاتر باعث نكروزيس سلول‌هاي HL-60 نسبت به گروه كنترل شدند. نتيجه گيري: با توجه به نتايج به دست آمده ميتوان نتيجه گرفت كه داروي تاموكسيفن از طريق افزايش بيان ژن CTNNBIP1 بر روي مسير سيگنالي Wnt و پروتئين بتا كاتنين اثر مهاري دارد.

Aim: The aim of this study was to investigate the apoptotic effect of the alcoholic extract of black seed on HL-60 cancer cells. Material and Methods: In this study, concentrations of 350, 650, 950 and 1250 µgml-1 of Nigella sativa alcoholic extract were added to HL-60 cancer cells for 24 h. MTT assay was applied to find out the portion of living cells. Likewise, PI staining for flow cytometry was performed to determine whether black seed extract inhibits the proliferation of HL-60 cells by modulating cell cycle progression and apoptosis, then AO/EB staining of HL-60 cells was performed to detect apoptosis and necrosis patterns. Results: MTT assay showed that in comparison with the control group, alcoholic extract of black seed killed 50% of HL-60 cell in the concentration of 650 µgml-1 and based on the concentration, more cell death was caused at the higher concentration. Also, a substantial increase in G0/G1 phase cells was observed from 15. 2% in the control group, up to 51. 65% in the group was treated with 650 µgml-1. It was also found that the concentration of 650 µgml-1 induced apoptosis in HL-60 cells, while at higher concentrations of 950 and 1250 µgml-1 caused HL-60 cells necrosis compared to the control group.