پديد آورندگان :
فلاحي، اكرم دانشگاه لرستان - گروه علوم دامي , محمدزاده، سعيد دانشگاه لرستان - گروه علوم دامي , فروهرمهر، علي دانشگاه لرستان - گروه علوم دامي
كليدواژه :
قطعهقطعه شدن DNA , خروس , اسپرم , عصاره رزماري
چكيده فارسي :
زمينه مطالعاتي: استفاده از آنتي‌اكسيدان‌ها سبب كاهش آسيبهاي وارده به سلول اسپرم طي سردسازي مي‌شود. هدف: اين پژوهش به‌منظور افزايش خصوصيات كيفي مني خروس به وسيله عصاره الكلي رزماري طي فرآيند سردسازي و نگهداري در دماي 4 درجه سلسيوس انجام گرفت. روش كار: جمعآوري مني دو بار در هفته در شش نوبت از 10 قطعه خروس بالغ با روش مالششكمي انجام گرفت. نمونههاي مني در هر نوبت، با رقيقكننده سكستون ارزيابي اوليه شد. سپس نمونهها به 6 قسمت تقسيم و پس از افزودن مقادير صفر (شاهد)، 15، 25، 35، 45 و 60 ميكروگرم در ميليليتر عصاره الكلي رزماري به هر قسمت، به مدت 72 ساعت در دماي 4 درجه سلسيوس نگهداري شدند. تحرك كل، زندهماني و سلامت غشاي پلاسمايي در زمانهاي صفر،24، 48 و 72 ساعت ذخيرهسازي بررسي شد. درصد قطعهقطعه شدن DNA در نمونهها پس از 48 ساعت ذخيرهسازي اندازهگيري شد. دادههاي به دست آمده با استفاده از نرم‌افزار آماري SAS (تكرار در اندازهگيري) در قالب طرح كاملاً تصادفي آناليز شد. ميانگين تيمارها توسط آزمون دانكن مقايسه شدند. نتايج: اضافه نمودن 35 ميكروگرم عصاره رزماري به رقيقكننده مني ميزان قطعهقطعه شدن DNA اسپرمها را كاهش داد (05/0P<). همچنين، 48 ساعت پس از ذخيرهسازي، تحرك، زندهماني وسلامت غشاي پلاسمايي اسپرم در نمونههايي كه 60 ميكروگرم عصاره رزماري به آن‌ها اضافه شد، پايينتر از گروه شاهد بود ( 05/0P<). پس از 48 ساعت ذخيرهسازي، تحرك، زندهماني و سلامت غشاي پلاسمايي اسپرم در نمونههايي حاوي 35 ميكروگرم بر ميلي ليترعصاره رزماري در رقيقكننده، بالاتر از گروه شاهد بود( 05/0P<). نتيجه‌گيري نهايي: بر اساس نتايج تحقيق حاضر، براي ذخيرهسازي اسپرم خروس در 4 درجه سلسيوس افزودن 35 ميكروگرم عصاره رزماري به رقيقكننده پيشنهاد مي‌شود.
چكيده لاتين :
Introduction: The increasing use of artificial insemination (AI) in the poultry industry emphasizes the need for the sharing of good quality sperm. The evaluation of semen quality characteristics of poultry gives an excellent sign of their reproductive potential and has been reported to be a major determinant of fertility and subsequent hatchability of eggs. In poultry industry in order to take advantage of new AI techniques, proper storage of poultry semen is needed. As poultry semen is viscous, highly concentrated, with low volume, containing 6 (chicken) to 12 (turkey) billion spermatozoa/ mL, the extension of good semen with a proper diluent is required prior to AI and storage. Reproduction performance is affected some factors include; nutrition, genetic, management, and environment. One of the fundamental aim in poultry industry is production of fertile eggs with high hatchability. In reproduction physiology, male and female are important, but sire effect is more than dam because of breeding program, semen samples could be applied for females. In layer industry, number of females are more than males; so, artificial insemination is an important tool for genetic diversity and high reproductive performance. One of the major problems in artificial insemination is low quality of poultry semen. Freezing and thawing have adverse effects on sperm viability. Since lipids (poly unsaturated fatty acids) are important part of plasma membrane of sperm cells, it could be destroyed in short times of storage in a liquid condition. It has been reported that antioxidants can be employed to prevent sperm damage during chilling storage condition (Malo et al. 2011). It is well known that sperm of farm animals is highly sensitive to oxidative stress (Surai et al. 1998). The high concentration of polyunsaturated fatty acids in the cell membrane of the sperm is also considered as another key factor for susceptibility to the oxidative stress. The process of semen production of reactive oxygen species (ROS) may lead to impairment of sperm morphology, motility, and finally viability. Pharmacological plants have some antioxidant components, which decrease free radical levels in organism. One of the major problems in sperm viability is sperm fragmentation. In this case, nucleus chromatin of sperm damages or splits. In some cases, the motility and normality of the semen analysis is acceptable, but the sperm nucleus of sample is damaged. Different tests are available for detection of sperm DNA damages like COMET assay, TUNEL assay, SCSA, and Sperm Chromatin Dispersion (SCD) test. Among these assays, the SCD test is a simple and low-cost method for the analysis of sperm DNA fragmentation (Shanmugam et al., 2014). This method is based on the principle that sperm with DNA fragmentation fails to produce halo of dispersed DNA loops when mixed with agarose followed by acid denaturation and nuclear protein removal. The halos can be visualized using bright-field microscopy after staining with Wright’s stain. This study was designed to evaluate the effects of Rosemary extract on rooster semen parameters during chilling storage condition at 4ºC.
