جداسازي باكتري هاي نمك دوست مولد اوره آز و مطالعه توليد نانوكريستال آن ها

باكتري هاي مولد آنزيم اوره آز مي توانند با توليد اوره آز در حضور اوره و كلسيم نانوكريستال هاي كلسيت توليد كنند. رسوب كلسيت طي فعاليت ميكروبي فرايندي است كه موجب سيماني شدن ذرات خاك در طبيعت مي شود. هدف از اين بررسي جداسازي باكتري هاي نمك دوست مولد اوره آز به منظور رسوب كلسيت در خاك هاي شور بود. نمونه هاي طبيعي اعم از خاك و آب هاي شور براي اين منظور انتخاب شدند. ابتدا با استفاده از محيط هاي TSB حاوي نمك باكتري هاي نمك دوست و سپس با استفاده از محيط هاي اختصاصي حاوي اوره و فنل رد باكتري هاي مولد اوره آز جداسازي شدند. جدايه‌هاي مولد اوره آز با آزادسازي آمونيوم موجب قليايي شدن محيط كشت و تشكيل هاله صورتي رنگ اطراف كلني ها مي شدند. سپس باكتري هاي منتخب كه هاله بيش تري داشتند طي سنجش آزادسازي آمونيوم به روش نسلر تحت بررسي قرار گرفتند. توانايي يا عدم توانايي توليد نانوكريستال جدايه ها با كشت به مدت 10 روز بر روي محيط رسوبي حاوي درصد نمك هاي متفاوت تحت بررسي قرار گرفت. مجموعا 110 جدايه نمك دوست جداسازي شد كه از اين ميان 58 جدايه مولد اوره آز بودند. مطالعات ميكروسكوپي كلني ها نشان داد كه تنها 6 جدايه بر روي محيط هاي رسوبي قادر به توليد كريستال هستند. جدايه 6 به منظور مطالعات بيشتر انتخاب و خصوصيات كريستال هاي آن طي تحليل هايي توسط XRD و ميكروسكوپ الكتروني روبشي (SEM) مجهز به EDX تحت بررسي قرار گرفت. مطالعات فعاليت اوره آزي نشان داد كه اين جدايه داراي قدرت آزادسازي آمونيوم به ميزان 20.86 ميلي مولار آمونيوم بعد از 18 ساعت است. اين باكتري طي تست هاي بيوشيميايي و مولكولي شناسايي شد و مقايسه توالي 16S rRNA آن تشابه 99.92 درصدي با استافيلوكوكوس زايلوسوس نشان داد و در بانك ژنومي NCBI با شماره دسترسي MG655155 ثبت شد. اين مطالعه نشان داد كه اين باكتري در محيط فاقد نمك و محيط حتي با نمك 10 درصد قادر به توليدكلسيت است. امروزه تلاش‌هاي زيادي در جهت توليد سيمان‌هاي پاك و زيستي انجام شده است و از همين رو استفاده از باكتري هاي متحمل به نمك مولد اوره آز كانديداهاي مناسبي به منظور سيمان سازي زيستي در محيط هاي شور است.