تاثير غلظت هاي تحت كشنده ديازينون بر بيان ژن ويتلوژنين در جنس ماده ماهي گورخري (danio rerio)

Effects of sublethal doses of diazinon on on the expression of vitellogenin (Vtg) gene in females Zebrafish (Danio rerio

در اين تحقيق تاثير دوزهاي مختلف سم ديازينون بر بيان ژن‌ يتلوژنين (vtg) درجنس ماده ماهي گورخري (danio rerio) بررسي شد. تعداد 600 قطعه بچه‌ ماهي‌ گورخري با ميانگين وزني 0/01±0/15 ‌گرم در 4 تيمار و 3 تكرار به مدت يك ماه تحت تاثير سه دوز سم 0/8، 1/6 و 3/2 ميلي گرم بر ليتر و تيمار شاهد قرار گرفتند. در انتهاي دوره جهت مطالعات ژنتيكي از كبد نمونه‌ برداري و استخراج rna انجام شد. براي سنتز cdna از كيت superscript rtase استفاده ‌شد و cdna حاصله با استفاده از پرايمرهاي ژن‌هاي مذكور و ژن بتا اكتين به‌ عنوان ژن رفرنس در real time pcr استفاده شد. ارزيابي بيان ژن ويتلوژنين كاهش بيان را در گروه هاي تيمار شده با سم ديازينون نسبت به گروه شاهد نشان داد. در گروه هاي تيمار شده با سم ديازينون (0/8، 1/6 و 3/2 ميلي گرم بر ليتر) ميزان بيان ژن ويتلوژنين به ترتيب 0/9، 0/69 و 0/39 برابر گروه شاهد بود كه الگوي كاهشي وابسته به دوزي را نشان مي دهد (p<0/05). نتايج مطالعه حاضر نشان مي دهد كه سم ديازينون مي تواند اثر منفي بر رشد و تكامل سلول هاي جنسي در جنس ماده ماهي زبرا داشته باشد.

The present study investigates, the effects of different doses of diazinon on the expression of vitellogenin (Vtg) gene in females Zebrafish (Danio rerio). For this purpose, 600 Zebrafish with average weight of 0.15+ 0.01 gr in 4 treatments and 3 replicates for one month were exposed to three doses of 0.8, 0.1 and 3.2 mg /ll of diazinon, and a control group for 30 days. At the end of fexpriment,RNA extracted from liver and brain, cDNA syntesised with Superscript RTase kit and PCR were done using primers relate to Vtg and Beta-actin as housekeeping gene. The evaluation of the expression of the vitellogenin gene showed significant reduction in diazinon-treated groups compared to the control. In the diazinon-treated groups (0.8, 1.6 and 3.2 mg / L), the expression of the vitellogenin gene was 0.9, 0.96 and 0.39 fold of control, respectively, which showed dose-dependent reduction pattern (P≤0.05). The results of this study indicate that diazinone can have a negative effect on the growth and development of sexual cells in zebra fish.