تاثير پپتيدهاي ضدرگ‌زايي بربيان ژن هاي caspase3 و caspase9 در مدل موش balb/c داراي سرطان پستان القا شده با رده سلولي 4t1

The effect of anti-angiogenesis peptides on expression of Caspase-3 and Caspase-9 genes in Balb / c mouse model of breast cancer induced by 4T1 cell line

سرطان پستان شايع‌ ترين نوع سرطان در زنان است و 25درصد تمام موارد سرطان را به خود اختصاص مي‌دهد. در همه سرطان‌ها از جمله سرطان پستان مراحل رشد، تهاجم و متاستاز وابسته به عوامل درون سلولي متعددي است كه يكي از آن ها فرايند رگ‌ زايي (آنژيوژنز) مي‌ باشد. هدف از اين مطالعه بررسي اثر پپتيد‌هاي ضد رگ زايي طراحي شده بر بيان ژن كاسپاز3 و كاسپاز9 در موش‌هاي balb/c بوده است. در اين تحقيق از نمونه بافت آماده موش هاي balb/c ماده استفاده گرديد كه قبلاً به تومور پستان موشي مشتق از رده سلولي 4t1 مبتلا شده بودند(پس از بي هوشي با تزريق درون صفاقي (ip) به مدت 3 تا 5 هفته به پهلوي چپ آن‌ها پيوند زده شده بود). سپس استخراج total rna از نمونه‌ هاي توموري تحت تيمار با پپتيدهاي ضد رگ ‌زايي در غلظت‌هاي1 و 10 ميكروگرم بر كيلوگرم انجام گرديد. سنتز cdna جهت پايدار كردن مولكول rna انجام شد. پرايمرها جهت انجام real time pcr براي هر دو ژن كاسپاز3 و 9 طراحي و سنتز شد. اختصاصيت اتصال پرايمرها به رشته الگو تاييد گرديد. سپس تجزيه و تحليل آماري با نرم‌ افزار spss انجام گرديد. نتايج حاصل از اين مطالعه نشان داد كه اختلاف معني‌ داري بين تيمارهاي هر گروه از پپتيد‌هاي ضد رگ ‌زايي (vegb1,vegb2,vegb3) در غلظت‌هاي 1 و 10 ميكروگرم بر كيلوگرم و ميزان بيان ژن كاسپاز3و9 وجود دارد (p<0/05). در واقع هر سه پپتيد ضد آنژيوژنز مي‌ تواند مسير سيگنالينگ vegfr را از طريق تنظيم مقادير كاسپاز3 و كاسپاز9 مهار كند و منجر به افزايش آپوپتوز در تومور گردد.

Breast cancer is the most important cancer in the world today, and accounts for 25% of all cases of cancer. In all cancers, including breast cancer, the stages of growth, invasion and metastasis are dependent on several intracellular agents, one of which is the angiogenesis process. The aim of this study was to evaluate the effect of anti-angiogenesis peptides designed to express the Caspase-3 gene and Caspase-9 in Balb / c mice. In this method, the tissue samples of Balb / c mice were previously used, which were previously infected with 4T1 cell-derived mammary tumors (after anesthesia by intraperitoneal injection (IP) for 3 to 5 weeks, their left side adjacent graft was struck). Extraction of TOTAL RNA from tumor samples treated with anti-angiogenesis peptides was performed at concentrations of 1 μg and 10 μg. Synthesis of cDNA was performed to stabilize the RNA molecule. Primers for Real time PCR were designed and synthesized for both Caspase-3 and 9 genes. The primer binding specificity has been confirmed to the pattern string. Statistical analysis was performed using SPSS software. The results of this study showed that there was a significant difference between the treatments of each group of anti-angiogenesis peptides (VEGB1, VEGB2, VEGB3) at concentrations of 1 μg/kg and 10 μg/kg in expression of caspase-3 gene expression (p<0.05). All three anti-angiogenesis peptides can inhibit the VEGFR signaling pathway by regulating caspase-3 and caspase-9 levels, leading to an increase in apoptosis in the tumor.