پديد آورندگان :
فضل آرا، علي دانشگاه شهيد چمران اهواز - دانشكده دامپزشكي - گروه بهداشت مواد غذايي , زارعي، مهدي دانشگاه شهيد چمران اهواز - دانشكده دامپزشكي - گروه بهداشت مواد غذايي , موالي زاده، احمد دانشگاه شهيد چمران اهواز - دانشكده دامپزشكي
كليدواژه :
يرسينيا انتروكوليتيكا , شير خام , آنتي‌بيوتيك , PCR
چكيده فارسي :
جهت مطالعه حاضر در طي مدت 6 ماه تعداد 150 نمونه شير خام گاو عرضه شده در منطقه ي اهواز تهيه و در شرايط سرما به آزمايشگاه منتقل شد. مقدار 25 ميلي ليتر از هر نمونه شير به داخل 225 ميلي ليتر از محيط غني سازي Tris-Buffered Peptone Water با pH معادل 8 افزوده گشته و به مدت 3 هفته در دماي 4 درجه سانتي گراد نگهداري شد و در روزهاي 7، 14 و 21، نسبت به انجام كشت خطي بر روي محيط كشت اختصاصي آگار CIN اقدام و در دماي 30 درجه سانتيگراد به مدت 24 ساعت گرمخانه گذاري شد. سپس كلونيهاي مشكوك به يرسينيا انتخاب و پس از انجام برخي آزمايش هاي بيوشيميايي اوليه در مرحله بعد جهت تشخيص قطعي از پرايمرهاي اختصاصي ژن كروموزومي 16s rRNA استفاده شد. در اين تحقيق يرسينيا انتروكوليتيكا از 36 نمونه (24 درصد) جدا شد. نهايتاٌ جدايه هاي تاييد شده جهت ارزيابي حساسيت آنتي بيوتيكي، بر روي محيط جامد كشت سطحي داده شد. نتايج تست سنجش حساسيت نشان داد كه صد در صد جدايه ها به سيپروفلوكسين حساس بودند. پس از آن به ترتيب (97/05درصد) به جنتامايسين، (91/17 درصد) به تتراسايكلين، (85/29 درصد) به سفتازيديم، (82/35 درصد) به ناليديكسيك اسيد، (79/41 درصد) به كانامايسين، (79/64 درصد) به تري متوپريم سولفامتاكسازول، (17/64 درصد) به آموكسي سيلين و (14/70درصد) به سفالوتين حساس بوند. همچنين در هيچ كدام از جدايه ها حساسيت به اريترومايسين مشاهده نشد كه نشان دهنده ي بيشترين مقاومت جدايه هاي يرسينيا انتروكوليتيكا به اين آنتي بيوتيك مي باشد.
چكيده لاتين :
Totally 150 samples of cow milk were collected in Ahvaz within 6 months. The collected samples were sent to the lab in cool conditions. The amount of 25 ml of each sample was added to 225 ml of Tris-Buffered Peptone Water with pH=8 as enrichment medium and stored at 4°C for three weeks. Then in 7th, 14th and 21th days of storage, one loopful equal to 10 µL of enriched broth were streaked out in plates of Cefsulodin-Irgasan-Novobiocin agar contained supplement and incubated at 30°C for 24 hours. Then 3 to 5 colonies of typical bull's-eye appearance with 0.5-2 mm diameter with a deep red center and sharp border surrounded by a translucent zone were selected as suspect to Yersinia enterocolitica and cultured in TSA medium. After gram staining and observe gram negative rod and also implement some biochemical tests in next step due to absolute identification, specific primers for 16srRNA were used. Boiling method was used to extract DNA. The isolation of Yersinia entroclitica was confirmed from 36 samples (24%) of milks. The confirmed isolates due to antibiogram were spread out in agar culture and the antibiotic susceptibility was surveyed with utilization of antibiotic discs and CLSI tables. The results showed that the sensitivity to Ciprofloaxin, Gentamicin, Tetracycline, Ceftazidime, Nalidixic Acid, Kanamycin, Trimethoprim Sulfametaxazole, Amoxicillin and Cephalotin were 100%, 97.05%, 91.17%, 85.29%, 82.35%, 79.41%, 67,64%, 17.64% and 14.7% respectively. None of the isolates were susceptible to Erythromycin which shows that the isolates have the most resistance against this antibiotic.
