مقايسۀ وكتورهاي بياني pET32a و pET25b در بيان توالي پلي اپيتوپي سنتز شده از آنتي‌ژن‌هاي انگل ليشمانيا اينفانتوم

زمينه: امروزه از روش‌هاي مولكولي در تشخيص بيماري‌ها، توليد واكسن‌ها، داروها و توليد پروتئين‌هاي نوتركيب استفاده مي‌شود، لذا يكي از مراحل مهم انتخاب وكتور مناسب براي كلون و بيان ژن‌هاي هدف است. از آنجا كه بيان پلي‌ژن‌هاي سنتتيك يا اصطلاحاً آنتي‌ژن‌هاي كايمريك با وزن مولكولي بالا نياز به شرايط ويژه‌اي دارد، مطالعۀ حاضر به هدف ارزيابي ميزان اهميت نوع وكتور براي بيان اينگونه آنتي‌ژن‌ها انجام شد. مواد و روش‌ها: توالي 1250 جفت بازي متشكل از اپي‌توپ‌هاي هشت آنتي ژن مهم انگل ليشمانيا اينفانتوم طراحي و توسط شركت بيوماتيك (كانادا) سنتز شد، توالي به‌صورت جداگانه درون دو وكتور بياني pET25b و pET32a كلون و سپس به باكتري (DE3) E.coli BL21ترانسفورم و تحت شرايط مشابه بيان شدند. ليزابه باكتري توسط SDS PAGE بررسي و با وسترن بلات مورد ارزيابي قرار گرفت.يافته‌ها: نتايج SDS PAGE و وسترن بلات نشان داد كه توليد پروتئين نوتركيب كامل و بي‌نقص توسط وكتور pET25b موفقيت‌آميز نبوده است. اين در حالي بود كه پروتئين نوتركيب حاصل از بيان توالي پلي‌اپي‌توپي مذكور در وكتور pET32a به‌صورت موفقيت‌آميزي توليد و تأئيد گرديد.نتيجه‌گيري: با توجه به بيان موفقيت‌آميز توالي پلي‌اپي‌توپي درون وكتور pET32a و شناسايي و تأئيد پروتئين مربوطه، از طرفي عدم موفقيت حصول پروتئين در وكتورpET25b نشان داد كه در مورد بيان برخي توالي‌هاي موزائيكي خاص كم بودن ويژگي حلاليت ممكن است به‌طور كلي دستيابي به پروتئين را با مشكل مواجه كند بنابراين انتخاب نوع وكتور بياني بايد با دقت بيشتري صورت گيرد.