شناسايي جهش IVSII-I ژن بتا گلوبين در ناقلين تالاسمي Minor با استفاده از روش High-Resolution Melting (HRM)

مقدمه: بتا تالاسمي يكي از رايج‌ترين اختلالات اتوزومي مغلوب در جمعيت جهاني است كه به وسيله‌ي بيش از 200 جهش مختلف در زنجيره‌ي بتا گلوبين، ايجاد مي‌شود. اين بيماري، از نظر باليني به سه حالت Minor، بينابيني و Major طبقه‌بندي مي‌شود. بتا تالاسمي، رايج‌ترين بيماري تك ژني در كشورهاي مديترانه، شرق ميانه، شبه قاره‌ي هند، جنوب شرقي آسيا و يكي از اختلالات وراثتي گسترده در ايران است. از ميان جهش‌هاي بتا تالاسمي مختلفي كه در جمعيت ايران تشخيص داده شده است، (G/A) IVSII-1 شايع‌ترين جهش در بيشتر نواحي ايران است. هدف مطالعه‌ حاضر، تعيين ميزان اختصاصيت و حساسيت روش HRM (High-resolution melting) در تشخيص افراد حامل جهش (G/A) IVSII-1 از افرادي بود كه اين جهش را نداشتند. روش‌ها: در اين مطالعه، 30 نمونه‌ي خون افراد مبتلا به تالاسمي Minor مورد بررسي قرار گرفت. ژنوتيپ هر نمونه، از قبل با استفاده از روش‌هاي PCR-RFLP (Polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism)، ARMS (Amplification-refractory mutation system) يا توالي‌يابي در آزمايشگاه ژنتيك بيمارستان الزهراي (س) اصفهان مشخص شده بود. استخراج DNA از خون محيطي انجام شد و نمونه‌ها با استفاده از روش HRM تعيين ژنوتيپ شدند. نتايج بر اساس نمودارهاي طبيعي‌سازي و تمايز، تجزيه و تحليل شدند. يافته‌ها: در اين مطالعه، روش HRM توانست افراد حامل جهش IVSII-1 را با اختصايت و حساسيت 100 درصد شناسايي كند. نتيجه‌گيري: روش HRM اختصاصيت و حساسيت بالايي دارد. از اين رو، روش مناسبي براي تشخيص جهش‌هاي شايع انواع بيماري‌هاي ژنتيكي مي‌باشد.