طراحي بيوانفورماتيك براي توليد واكسن پپتيدي Vascular Endothelial Growth Factor-A (VEGFA) انساني و ارزيابي آنتي‌بادي پلي‌كلونال اختصاصي آن در موش

مقدمه: بافت توموري، بدون فرايند آنژيوژنز نمي‌تواند بيش از 2 ميلي‌متر مكعب در بدن رشد كند. عامل رشد اندوتليال عروقي (Vascular endothelial growth factor يا VEGF) نقش حياتي در اين فرايند دارد و مهار آن، مي‌تواند به عنوان يكي از راهبردهاي ايمني‌درماني سرطان به كار رود. روش‌ها: توالي پپتيدي ايزوفرم‌هاي VEGF-A، از پايگاه‌هاي داده‌ي پروتئيني، انتخاب و با نرم‌افزارهاي رايج هم‌راستاسازي گرديد. اپي‌توپ‌هاي تحريك كننده‌ي پاسخ ايمني شناسايي و از نظر عدم هم‌پوشاني با ساير پروتئين‌هاي بدن بررسي شدند. توالي پپتيدي، پس از توليد با Keyhole limpet hemocyanin (KLH) كونژوگه شد و جهت ايمن‌سازي موش‌ها استفاده گرديد. تيتر آنتي‌بادي پلي‌كلونال ضد VEGF-A با روش Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) و با كمك پپتيد كونژوگه شده با آلبومين سرم گاوي (Bovine serum albumin يا BSA) اندازه‌گيري شد. يافته‌ها: توالي پپتيدي 41 اسيد آمينه‌اي انتخابي از نظر بيوانفورماتيك هيچ گونه هم‌پوشاني با ساير پروتئين‌هاي بدن نشان نداد و از لحاظ نظري، آنتي‌ژنيسيته‌ي كافي و توانايي تحريك پاسخ ايمونولوژيك ضد توموري را داشت. با روش ELISA، در موش‌هاي واكسينه در مقايسه با گروه شاهد افزايش تيتر آنتي‌بادي اختصاصي مشاهده شد. الكتروفورز پپتيد كونژوگه با BSA، نشان داد كه كونژوگاسيون به طور مؤثري انجام شده و مراحل بهينه‌سازي آزمون ELISA اثبات كرد كه در صورت پوشاندن پليت‌هاي ELISA با كونژوگه‌ي پيش‌گفته، نتايج حاصل تكرار پذيري بهتري نسبت به پوشاندن پليت با پپتيد خالص دارد. نتيجه‌گيري: نتايج بر كارآمدي پپتيد كونژوگه با KLH جهت ايمن‌سازي و توليد آنتي‌بادي پلي‌كلونال ضد VEGF تأكيد داشت. بالا بودن تيتر آنتي‌بادي توليد شده بر ضد اين آنتي‌ژن، پيشنهاد مي‌كند كه اين پپتيد، مي‌تواند به عنوان تحريك كننده‌ي سيستم ايمني در مدل حيواني به كار رود.