بررسي نواحي پروموتور و بيان ژن‌هاي nobox، ovol1 و zp3 در بافت فوليكول تخمدان ميش‌هاي نژاد شال

Promoter and expression analysis of nobox, ovol1 and zp3 genes in ovarian follicles of Shall ewes

فاكتور‌هاي نسخه برداري با اتصال به نواحي پروموتوري ژن‌ها و تنظيم بيان آن‌ها نقش مهمي در كنترل باروري حيوانات دارند. در اين مطالعه، بيان ژن‌هاي nobox، ovol1 و zp3 كه از ژن‌هاي كانديد درگير در مسير‌هاي تنظيمي ژن‌ها مي‌باشند، در دو گروه چند قلوزا و تك قلوزاي گوسفندان شال بررسي شد. تعداد شش رأس گوسفند با توجه به شجره آنها از گله اصلاح شده ايستگاه شال قزوين جدا شده و براي اين تحقيق مورد استفاده قرار گرفتند. پس از همزمان سازي فحلي، گوسفندان با روش بيهوش عمومي جراحي شده و فوليكول‌هاي بالغ تخمدان با روش آسپيره كردن استحصال شدند. پس از استخراج RNA، cDNA نمونه‌ها ساخته شد. براي بررسي بيان ژن‌هاي فوق، آغازگر‌هاي اختصاصي هر ژن طراحي شده و سپس با استفاده از روشReal-Time PCR و با بكارگيري روش ΔΔCt بيان نسبي ژن‌ها سنجيده شد. مقايسات بين ميانگين ها، با استفاده از رويه آماري T-Test انجام شد. همچنين با استفاده از نرم‌افزار BDGP نواحي پروموتوري و فاكتور‌هاي نسخه‌برداري ژن‌هاي مورد مطالعه بررسي شد. بيان ژن‌هاي nobox و ovol1 در گروه حيوانات چندقلوزا، معني‌دار بود (P

Transcription factors have important role in controls of animal fertility by binding to promoter regions of genes and regulation of their expression. In this study, nobox, ovol1 and zp3 genes expression, that are candidate genes involved in regulatory pathways of genes, in two categories of uniparous and multiparous Shall sheep were investigated. According to the pedigree of animals, a totally of six ewes selected from the herd of Qazvin Shall breeding center and applied for this experiment. After estrus synchronization, ewes were operated by general anesthesia technique and ovarian mature follicles were extracted by aspiration. After RNA extraction, sample’s cDNA was constructed. To investigation the expression of the above genes, a set of specific primers was designed for a gene, and then relative expression of these genes were measured using Real-Time PCR method and by employment of ∆∆Ct approach. Comparisons between the averages of data were done by T-Test Statistical procedure. In addition, promoter region and transcription factors of the genes investigated using BDGP software. The expression of nobox and ovol1 genes were significant in multiparous animals category (P