توليد پپتيد YY(3-36) در سيستم بياني Escherichia Coli با استفاده از پروموتر خود القايي

استفاده از القاگرهاي سمي، مانند Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG)، در توليد زيست‌داروها بر اساس رهنمودهاي سازمان‌هاي نظارتي ممنوع مي‌باشد. از اين رو، مطالعه‌ي حاضر با هدف ارزيابي و بررسي امكان استفاده از سيستم‌هاي بياني خود القايي براي توليد پپتيد YY(3-36) به عنوان يك ماده‌ي اوليه‌ي دارويي (Active pharmaceutical ingredient يا API) در سيستم بياني Escherichia coli انجام شد.روش‌ها: توالي پروموتر خود القايي با استفاده بانك‌هاي اطلاعاتي به دست آمد. سپس، توالي مورد نظر در وكتور pUC18 سنتز شد. ژن كد كننده‌ي YY(3-36) نيز با سنتز پرايمر در انتهاي’3 پروموتر قرار داده شد. البته، جهت بيان خارج سلولي، يك توالي 22 اسيد آمينه‌اي سيگنال ترشحي آنزيم آسپاراژيناز در قسمت بالادستي ژن پپتيد مورد نظر قرار داده شد. پس از آماده‌سازي باكتري Escherichiacoli از وكتور pUC18 براي انتقال ژن به باكتري استفاده شد. سپس، با مقايسه‌ي بيان ژن پپتيد در سيستم بياني pET22 به عنوان شاهد مثبت، بيان پپتيد در دو حالت خودالقايي و استفاده از IPTG با استفاده از ژل الكتروفورز بررسي گرديد.يافته‌ها: ميزان بيان با پروموتر خود القاگر در مقايسه با شاهد مثبت (IPTG با غلظت 1 ميلي‌مولار) مناسب بود.نتيجه‌گيري: يافته‌هاي مطالعه‌ي حاضر حاكي از سهولت و اقتصادي بودن كاربرد پروموتر انتخابي در توليد زيست‌داروهاي با ارزش افزوده‌ي بالا مي‌باشد.