تأثير عصاره زغال اخته در رقيق كننده مني بر كيفيت مني قوچ بعد از فرآيند انجماد - يخ گشايي

Effect of Bilberry extract in semen extender on ram semen quality after freeze-thawing process

تأثير سطوح مختلف عصاره اتانولي گياه زغال اخته در بهبود كيفيت مني قوچ طي فرآيند انجماد - يخ­ گشايي بررسي شد. در اين مطالعه از 5 قوچ، 2 بار در هفته به كمك واژن مصنوعي اسپرم­ گيري شد. به‌منظور از بين بردن اثرات فردي، نمونه ­هاي مني گرفته شده با هم مخلوط شدند. سطوح مختلف عصاره زغال اخته (صفر، 100، 150، 200 ميكروليتر در ميلي­ليتر) به رقيق­ كننده بر پايه تريس افزوده شد. نمونه­ هاي مني پس از سردسازي و انجماد تا زمان ارزيابي در داخل ازت مايع نگهداري شدند. بعد از يخ­ گشايي، پارامترهاي تحرك توسط سيستم آناليز اتوماتيك اسپرم (CASA)، زنده­ ماني با استفاده از رنگ­آميزي ائوزين - نيگروزين، يكپارچگي غشاء با استفاده از محلول هيپواسموتيك، سنجش اسپرم­هاي غيرنرمال توسط محلول هانكوك و پراكسيداسيون ليپيدها با اندازه­گيري غلظت مالون­دي­آلدهيد ارزيابي شدند. نتايج نشان داد كه افزودن 150 ميكروليتر از عصاره زغال اخته سبب بهبود معني­دار پارامترهاي اسپرم نسبت به گروه شاهد بعد از فرايند انجماد – يخ‌گشايي شد (05/0>P). باتوجه به نتايج تحقيق حاضر، مي­توان از عصاره زغال ­اخته به عنوان يك آنتي ­اكسيدان طبيعي، با كارايي بالا، ارزان و در دسترس در رقيق­كننده­هاي اسپرم قوچ استفاده نمود.

In order to improve the quality of ram semen after freezing-thawing process, different levels of ethanol extract of Bilberry plants were investigated. In this study five rams were used for semen collection twice a week by an artificial vagina. In order to eliminate the effects of the individual, the semen samples were pooled. Different levels of Bilberry extract (0, 100, 150, 200 μl/ml) were added to the Tris- Egg yolk based extender. Following cooling and freezing of semen samples, they were stored in liquid nitrogen until evaluation. After freezing-thawing, motility parameters were evaluated using the Computer-assisted sperm analysis system (CASA), the viability of sperms by Eosin-Nigrosin staining, membrane integrity using the hypo-osmotic swelling test, sperm abnormality by Hancock solution and lipid peroxidation by measuring malondialdehyde concentration. The results showed that the addition of 150 μl of Bilberry extract improved sperm parameters following freezing-thawing process compared to the control group (P< 0.05). According to the results of this study, Bilberry extract can be used as a natural antioxidant, with high performance, inexpensive and available in ram sperm diluent.