اثرات ژله رويال بر بيان ژن هاي كدكننده آنزيم هاي آنتي اكسيدان در بلوغ و توليد برون تني رويان بز

Effect of royal jelly on gene expression of antioxidant enzymes in in vitro maturation and embryo development of goat oocytes

اثر غلظت هاي مختلف ژله رويال به عنوان يك آنتي اكسيدان، بر بلوغ برون تني تخمك بز در يك طرح كاملا تصادفي با چهار تيمار ( غلظت هاي صفر (شاهد)، پنج، 10 و 20 ميلي گرم بر ميلي ليتر ژله رويال) بررسي شد. تخمدان هاي بز از كشتارگاه جمع آوري و مجموعه اووسايت كومولوس بز از فوليكول هاي آنترال جدا شدند و در محيطMedium 199 به همراه غلظت هاي مختلف ژله رويال كشت داده شدند. اووسايت ها پس از 24 ساعت به بلوغ رسيدند. نتايج نشان داد كه افزايش غلظت ژله رويال به طور معني داري ( 05/0P< ) نرخ بلوغ برون تني تخمك ها را از 54 درصد (تيمار شاهد) به 93 درصد (تيمار20 ميلي گرم در ميلي ليتر) افزايش داد. افزايش غلظت ژله رويال در محيط كشت بلوغ، موجب افزايش معني دار ( 05/0P< ) نرخ كليواژ از 64/2±5/62 درصد (تيمار شاهد) به 78/3±6/85 درصد (تيمار 20ميلي گرم در ميلي ليتر) و نرخ توليد بلاستوسيت از 26/2±4/15 درصد (تيمار شاهد) به 42/3±6/38 درصد (تيمار20 ميلي گرم در ميلي ليتر) شد. با افزايش غلظت ژله رويال در محيط، بيان نسبي ژن هاي سوپراكسيد ديسموتاز و گلوتاتيون پراكسيداز و كاتالاز به طور معني داري (05/0P< ) افزايش يافت. بر اساس نتايج حاصل، افزودن 20 ميلي گرم بر ميلي ليتر ژله رويال در محيط بلوغ تخمك، موجب بهبود وضعيت اكسيداتيو، بلوغ هسته اي تخمك و رشد و نمو بلاستوسيست بز شد.

This research was conducted to investigate the effect of different concentrations of royal jelly (RJ) as an antioxidant source on in vitro maturation of goat oocytes. Goat ovaries were collected from a local abattoir. Cumulus-oocyte-complexes (COCs) were recovered from antral follicles. The COCs were placed in maturation medium and were reached to MII stage after 24 hours. The results indicated that the increasing of royal jelly concentration in the maturation media was significantly increased maturation rate of oocytes from control (54 ± 0%) to 20 mg/mL group (93 ± 0.5%). Also, the higher RJ concentrations were associated with increased cleavage (62.5 ± 2.64% to 85.6 ± 3.78%) and blastocyst rate (15.4 ± 2.26% to 38.6 ± 3.42%) from the RJ0 to the RJ20 group. Addition of RJ was significantly (P<0.05) increased the antioxidant gene expressions in the oocytes. In conclusion, supplementation of 20 mg/mL royal jelly to the maturation media was significantly improved the redox state, nuclear maturation and blastocyst formation.