باززايي و اندام­ زايي با عملكرد بالاي بادمجان در محيط كشت مصنوعي

High performant eggplant in vitro regeneration and organogenesis

بادمجان يك گياه جاليزي مهم كه در مناطق مختلف گرمسيري و معتدل رشد ميكند. باززايي بادمجان در محيط مصنوعي جهت تعيين كردن غلظت مناسب و كارآمد هورمون هاي گياهي به منظور اندام زايي از بافت كوتيلدون و برگ انجام شد. بافت كوتيلدون 10 روزه و بافت برگ 25 روزه در محيط كشت MS حاوي ويتامينهاي B5 و 2% ساكارز و در 10 غلظت مختلف از هورمونهايNAA، BAP، TDZ، 2،4-D و IAA كشت گرديدند. بافتهاي كشت شده در دماي 2 ± 25 درجه سلسيوس تحت 16:8 ساعت روشنايي و تاريكي قرار گرفتند. اندام هاي خوب باززايي شده (ساقه) بعد از سه هفته به محيط كشت جديد جهت افزايش طول ساقه منتقل شدند. تمام بافت هاي كوتيلدون و برگ توده هاي كالوس يا بافت هاي متمايز نشده مختلفي توليد كردند ولي تنها كالوس هاي سفيد و ترد قادر به توليد جوانه هاي قوي بودند. بالاترين بازدهي محيط كشت مربوط به محيط كشت جوانه SRM10 كه محيط كشت MS حاوي 2 ميلي گرم در ليتر TDZ، 5/0 ميلي گرم در ليتر BAP و 0.5 ميلي گرم در ليتر هورمون NAA بود كه بيشترين مقدار بازدهي و توليد را در هر دو نوع بافت نشان داد. ساقه-زايي و اندام زايي از بافت كوتيلدون خيلي بيشتر از بافت برگ بوده و به طور متوسط از هر پنج بافت كوتيلدون و برگ در هر ظرف پتري به ترتيب 33/ 0 ± 4.3 و 67/ 0 ± 1/6 بافت اندام زايي ايجاد كردند. درصد باززايي بافت كوتيلدون و برگ در محيط كشت SRM10 به ترتيب 6/67 ± 6/ 86 و 3/ 13 ± 3/ 33 بود. اين تحقيق مي تواند راه حلي جهت توليد بادمجان تراريخته ارايه داده و باززايي و توليد گياهان بالغ را در محيط مصنوعي ايجاد نمايد.

Eggplant is a notable vegetable crop grown in a variety of tropical and temperate regions. In vitro regeneration of eggplant was established to determine an efficient phytohormone concentration for development of organogenesis from cotyledon and leaf explants. Ten-day old cotyledon and 25-day old leaf explants were cultured on MS medium amended with Gamborg’s B5 vitamins and 2% sucrose in 10 different concentrations and combinations of NAA, BAP, TDZ, 2,4-D and IAA phytohormons. Cultured explants were incubated at 25 ± 2 ºC for 3 weeks under 16:8 h photoperiod. Well-grown regenerated shoots were transferred to fresh growth medium after 3 weeks for shoot elongation. All cotyledon and leaf explants produced various callus masses but only white and friable ones were able to regenerate into vigorous shoots. Shoot regeneration medium (SRM10) containing MS + TDZ 2 mg/L + BAP 0.5 mg/L + NAA 0.5 mg/L showed high potential in organogenesis of both explant types. Shoot regeneration and organogenesis from cotyledon explants were much more advantageous than leaf explants. The average of cotyledon and leaf explants producing shoot were 4.3 ± 0.33 and 1.6 ± 0.67 out of 5 in each plate, respectively. The percentages of regenerated shoots in cotyledon and leaf explants cultured on SRM10 were 86.6 ± 6.67 and 33.3 ± 13.3%, respectively. Current work can shed a light on production of transgenic eggplants and can be followed by normal mature plants regeneration.