معرفي آزمايش الايزاي مبتني بر پروتئين MBP-G1 به عنوان روش شناسايي گاوميش هاي آلوده به ويروس تب بيدوام گاوي

Introduction of ELISA based on MBP-G1 protein for detection of bovine ephemeral fever virus-infected water buffalo

تب بيدوام گاوي (BEF) يك بيماري غير واگيردار در گاو و گاوميش ميباشد كه در مناطق گرمسيري و نيمه گرمسيري آسيا، استراليا و افريقا پراكنده شده است. هدف از مطالعه حاضر، بررسي واكنشپذيري پروتئين همجوش MBP-G1 بيان شده در باكتري اشرشياكلي در يك آزمايش الايزاي غير مستقيم خانگي بود. به اين منظور پس از كلونينگ ژن G1 از گليكوپروتئين G ويروس تب بيدوام گاوي در ناقل pMalc2x و متعاقباً بيان پروتئين در سويه Rosetta اشرشياكلي، پروتئين نوتركيب MBP-G1 توليد شده به عنوان آنتيژن پوشاننده كف پليت در يك آزمايش الايزا استفاده شد. نتايج آزمايش الايزا نشان داد كه اين پروتئين نوتركيب توانايي واكنش با سرم موشهاي ايمن شده با واكسن تجاري تب بيدوام گاوي و شناسايي آنتيباديهاي ضد ويروس BEF را داشت. بنابراين ميتوان پروتئين همجوش MBP-G1 بيان شده در اشرشياكلي را به عنوان يك نامزد مناسب جهت طراحي كيت الايزا براي شناسايي گاوميشهاي آلوده به ويروس BEF معرفي نمود.

Bovine ephemeral fever (BEF) is a non contagious disease of cattle and water buffalo, spanning in tropical and subtropical zones such as Asia, Australia, and Africa. The aim of this study was to investigate the reactivity of the fusion MBP-G1 protein expressed in Escherichia coli in an indirect in-house ELISA. In order to, after cloning of the G1 gene of bovine ephemeral fever virus (BEFV) G glycoprotein into pMalc2x vector and subsequently expression in Rosetta strain of Escherichia coli, recombinant MBP-G1 proteinwasused as a coating antigen to develop an ELISA. Results showed that the expressed G1 protein could react with immunized mice serum with commercial BEF vaccine and detect of antibodies against BEFV. Thus, the expressed fusion MBP-G1 protein can be introduced as an ideal candidate to develop an ELISA for detection of BEFV-infected water buffalo.