تشكيل بيوفيلم در ميان سويه هاي استافيلوكوكوس اپيدرميديس جدا شده از افراد سالم در اصفهان

Biofilm Formation among Staphylococcus epidermidis Strains Isolated from Healthy People in Isfahan

سابقه و هدف: استافيلوكوكوس اپيدرميديس به عنوان نرمال بيوتاي ساكن پوست انسان شناخته مي شود كه بر خلاف استافيلوكوكوس اورئوس فاقد عوامل حدت مختلف جهت بيماري زايي است؛ بنابراين تشكيل بيوفيلم به عنوان تنها عامل بيماري زايي در اين باكتري بايد مورد بررسي قرار گيرد. كم توجهي به اين دسته از باكتريهاي نرمال بيوتاي انساني مولد بيوفيلم كه از مقاومت بالايي نسبت به كلاسهاي مختلف آنتي بيوتيكي برخوردار مي باشند يك تهديد عمده براي بهداشت عمومي به شمار مي رود. اين مطالعه با هدف جداسازي و بررسي فنوتيپي و ژنوتيپي سويه هاي استافيلوكوكوس اپيدرميديس مولد بيوفيلم جداسازي شده از افراد سالم در شهر اصفهان در سال 1395 به انجام رسيده است. روش كار: جهت انجام نمونه گيري 100 فرد سالم انتخاب شدند و تمامي جدايه ها با استفاده از پرايمر اختصاصي تا حد گونه مورد شناسايي قرار گرفتند و توانايي تشكيل بيوفيلم در ميان آنها با تركيبي از روشهاي كيفي كنگو رد آگار و روش كمي ميكروتيتر پليت مورد بررسي قرار گرفت. علاوه بر اين، حضور ژنهاي aap aicaABCD و IS256 با استفاده از آزمون PCR مورد بررسي قرار گرفت. يافته ها: با استفاده از آزمون PCR تمامي 123 سويه جداسازي شده مورد تأييد قرار گرفتند. در سنجش كمي بيوفيلم، 12/2 درصد سويه ها قابليت اتصال قوي به سطح پلي استيرن ميكروپليتها را داشتند. از سوي ديگر، 6/ 5 درصد سويه هاي استافيلوكوكوس اپيدرميديس قادر به تشكيل كلني مشكي در پليتهاي كنگو رد آگار بودند و به عنوان سويه هاي اسلايم مثبت شناسايي شدند. حضور زنهايIS256 ، ical aicaB aica و aap به ترتيب محدود به 3/ 3، 3 / 4، 3 / 3، 0 و 52 درصد سويه ها بود نتيجه گيري: نتايج حاصل از اين مطالعه نشان دهنده انتشار سويه هاي استافيلوكوكوس اپيدرميديس مولد بيوفيلم در ميان افراد سالم در شهر اصفهان است. با توجه به اينكه در نمونه هاي باليني معمولا سويه هاي استافيلوكوكوس اپيدرميديس به عنوان سويه هاي آلوده كننده شناخته مي شوند؛ لذا شناسايي صحيح اين سويه ها در نمونه هاي باليني مي تواند كمك شاياني به متخصصان در تشخيص عفونتهاي باليني نمايد. حضور ژنهاي ical icad همراه با شيوع بالاي ژن Gap در ميان سويه هاي استافيلوكوكوس اپيدرميديس توليد كننده بيوفيلم نشان دهنده اين مطلب است كه قابليت ايجاد icd و aap و بيوفيلم به طور مشترك در كلونيهاي خاص استافيلوكوكوس اپيدرميديس مشاهده مي شود و به صورت ترجيهي در بيمارستان و جامعه منتشر مي شود.

Background and objective Staphylococcus epidermidis is known as the normal flora residing in the human skin unlike Staphylococcus aureus lacks different virulence factors of pathogenesis, so biofilm formation should be considered as the unique pathogenic element in these bacteria. Prevalence of biofilm producing strains in healthy people could be a significant health challenge. The aim of this study was the isolation and phenotypic and genotypic analysis of biofilm formation among S. epidermidis strains isolated from healthy people samples in Isfahan, Iran during 2016. Materials and methods Sampling was carried out from 100 healthy people and all isolated strains were identified at the species level using specific primers and their ability to form biofilm was determined using combination of qualitative Congo-Red agar and quantitative microtiter plate assay. In addition the presence of icaABCD, aap and IS256 genes was detected by polymerase chain reaction (PCR). Results Using PCR, all 123 isolated strains were confirmed as S. epidermidis strains. The quantitative biofilm assay showed that 12.2% of strains were able to attach strongly to polystyrene microplates. On the other hand, 6.5% of S. epidermidis strains, respectively, were able to form black colonies on Congo-red agar plates and were slime positive. The presence of icaA, icaB, icaD, IS256 and aap genes was limited to 3.3, 3.3, 3.3, 0 and 52 % of strains. Conclusion The results of this study are indicated the spread of biofilm producing and antibiotics resistance Staphylococcus epidermidis strains among healthy people in Isfahan city. Due to the fact that S. epidermidis strains are usually considered as the contaminant strains in the clinical samples, precise diagnosis of these strains in the clinical samples can be a great help to the specialists in diagnosing clinical infections. Presence of icaA and icaD genes with high prevalence of aap gene among biofilm producing S. epidermidis strains suggests that ica, aap and biofilm forming ability occur jointly in specific S. epidermidis clones and spread preferentially in the hospital and community.