بررسي لقاح و كشت جنين گاوي در سيستم هم كشتي سلول هاي بنيادي مزانشيمي موش صحرايي

Evolution of bovine embryos cleavage in co-cultuer M.S.Cs deried from adipose tissues rat

سابقه و هدف: يكي از پركاربردترين منابع سلولي در مهندسي بافت و بهينه‌سازي محيط‌هاي كشت، سلول-هاي بنيادي مزانشيمي (MSCs) مي‌باشد. در مطالعه حاضر، سلول‌هاي بنيادي موش به عنوان هم‌كشتي مورد استفاده قرار گرفت. از آنجاييكه مشكل عمده روش كشت جنين در شرايط آزمايشگاهي قابليت حياتي كاهش يافته جنين‌هاي آزمايشگاهي در مقايسه با همتاهايشان در شرايط حياتي است، هدف از اين مطالعه ارزيابي لقاح و كشت جنين گاوي در هم‌كشتي با سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي مشتق از بافت چربي (ADMSCs) است. مواد و روش‌ها: در اين مطالعه، پس از آماده سازي وجداسازي سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي از بافت چربي، اين سلول‌ها در كف چاهك‌ها كشت شدند. سه روز پس از كشت سلولي، تخمك و جنين‌هاي گاوي به روي تك لايه منتقل گرديد و تا 7 روز كيفيت بلوغ و نوع تسهيم سلولي بررسي گرديد. يافته‌ها: ميزان بلوغ و زنده‌ماني و تسهيم سلولي جنين‌ها تا روز هفتم ارزيابي شد. اين مطالعه نشان داد كه هم‌كشتي با سلول‌هاي بنيادي مزانشيمال بطور معني‌داري زنده‌ماني و تسهيم جنين را در مقايسه با گروه كنترل (جنين‌هاي بدون هم‌كشتي) افزايش داده است (P<0.05)، بطوريكه ميزان بلوغ تخمك‌هاي گاوي گروه هم‌كشتي با سلول‌هاي مزانشيمال نسبت به گروه كنترل به ترتيب 82 و 78 درصد و همچنين ميزان تقسيم سلولي تا مرحله بلاستوسيست در مقايسه با گروه كنترل به ترتيب 33 و 26 درصد بوده است. نتيجه گيري كلي: نتايج كلي طرح نشان مي دهد كه تسهيم جنين در مقايسه با جنين هاي بدون هم كشتي افزايش و ميزان تقسيم سلولي نيز افزايش داشته است.

Mesenchyme Stem cells (MSCs) are one of the widely used sources in tissue engineering and efficacy of cultural environment. In this survey, rat stem cells are used as coculture. Owing to main obstacle of embryo culture in the lab medium, the survival of embryo in lab is low in comparison with that of normal conditions. The purpose of this research is the survey of fertilization and culture of bovine embryos in mesenchymal stem cells derived from adipose tissue (ADMCs). Approach Isolated ADMCs were cultured on 4-well dishes. Three days after cell culture, the bovine immature oocytes were transferred on this mono layer system and the in vitro matured oocytes were fertilized by sperms in another MSCs free environment subsequently. Then in vitro fertilized embryos were co-cultured with the same mono layer of ADMCs for seven days. During oocyte and embryo co-culture, the rates of maturation and cleavage were assessed. Achievements This study reveals that co-culture of embryos with mesenchymal stem cells could increase the survival and cleavage of embryos significantly (P<0.05). The maturation rate of bovine co-cultured oocytes (%82) in comparison with that of control group (%78) has increased significantly. Also, the rate of blastocyst formation in co-cultured embryos (%33) was analytically comparable with that of control group (%26). Conclusion What bolsters substantially the quality and development of embryo is coculture systems.