اثر آنتي باكتريال مليتين استخراج شده از زهر زنبور عسل ايراني بر سويه هاي آسينتوباكتر بوماني جدا شده از عفونت سوختگي بيمارستاني

Antibacterial Activity of Melittin Purifed from Iranian Honey Bee Venom Against Strains of Acinetobacter baumannii Isolated from Nosocomial Burn Infection

سابقه و هدف: آسينتو باكتر بوماني يك عامل بيماريزاي خطرناك و يك پاتوژن مهم در بيمارستان هاي سطح جهان بوده و از عوامل مهم در ايجاد عفونت سوختگي به شمار مي رود. امروزه تعداد آسينتوباكتر بوماني هاي مقاوم به چندين آنتي بيوتيك رو به افزايش است و به همين دليل پيشنهاد مي شود كه براي درمان عفونت هاي ميكروبي از پپتيد هاي ضد ميكروبي استفاده شود. لذا هدف از اين تحقيق تعيين اثر آنتي باكتريال مليتين استخراج شده از زهر زنبور عسل ايراني بر سويه هاي آسينتوباكتر بوماني جدا شده از عفونت سوختگي بيمارستاني در شرايط in vitroتعيين گرديد. روش كار: نمونه هاي آسينتوباكتر بوماني از مركز آموزشي درماني شهيد مطهري تهران جمع آوري و مجددا جنس و گونه سويه ها تشخيص داده شد. پپتيد مليتين با تكنيك كروماتوگرافي HPLCفاز معكوس از زهر زنبور عسل تخليص شده و ليوفيليزه گرديد. سپس غلظت و كيفيت مليتين تعيين و كنترل شد. پس از تعيين MICو MBCمليتين، نتايج آن با آنتي بيوتيك ايمي پنم مقايسه گرديد. يافته ها: ميانگين MICو MBCمليتين در كل جمعيت باكتريايي به ترتيب 0/79و 1/59ميكروگرم و همچنين ، MIC50 MBC50 ،MIC90و MBC90مليتين به ترتيب 0/55 ، 1/1،1/1و 2/17نه ها به ايمي پنم مقاوم، %8داراي مقاومت حد واسط و %6حساس گزارش شدند. همچنين %78از نمونه ها در برابر ايمي پنم داراي MICبيشتر از 32ميكروگرم و 100% از نمونه ها داراي MBCبالاتر از 32ميكروگرم بودند. نتيجه گيري: مقايسه درصد مهاري و كشندگي مليتين با ايمي پنم نشان داد كه قدرت مهاري و كشندگي مليتين از ايمي پنم بسيار بيشتر است. بر اساس نتايج به دست آمده مي توان استنباط كرد كه پپتيد مليتين مي تواند در آينده به عنوان يك عامل پيش گيري كننده يا درماني بر عليه كلونيزاسيون باكتري ها در بيماران بستري به كار رود.

Background an‎d Objective Acinetobacter Baumannii is a dangerous pathogen in many hospitals around the world and is considered an important life threatening factor in burn infections. Nowadays the numbers of multidrug resistance A. baumannii are being rising. In this case, Antimicrobial peptides could be an appropriate solution for treating bacterial infections. Concerning to the problem, this project was aimed to study of antibacterial activity of melittin purified from Iranian honey bee venom on clinical isolates of A. baumannii from hospitalized burn patients. Materials an‎d Methods In this study, A. baumannii strains collected from Shahid Mottahari burn center. Genus and species of the strains were detected by routine methods. Melittin purified from bee venom by Reverse Phase HPLC technique and then lyophilized. Melittin concentration measured by BCA method and the quality of melittin was confirmed using SDS-PAGE. After determining the MIC and MBC of melittin, the results were compared with antibacterial activity of imipenem. Result The average of MIC and MBC for melittin in total bacterial population was determined at 0.79 and 1.59 microgram respectively. MIC50, MIC90, MBC50, and MBC90 for melittin calculated as 0.55, 1.1, 1.1 and 2.17 micrograms respectively. In this study, according to the CLSI standard, imipenem-resistant, sensitive, and intermediate strains were 86, 8, and 6 % respectively and also 46% of bacteria had MIC greater than 32 micrograms against imipenem. 100% of the samples had MBC above 32 microgram respectively. Conclusions Comparison of inhibitory and bactericidal activity of melittin with imipenem showed that antibacterial activity of melittin is very greater than imipenem. Based on the results it can be concluded that melittin would be used as a preventive or treating agent against colonization of bacteria in burn patients in future.