بررسي وجود ژن هاي مقاومت چند دارويي در سويه هاي اشريشيا كلي اوروپاتوژنيك با روش Multiplex-PCR

Detection of Multi-drug Resistance Genes in Uropathogenic E. coli by Multiplex-PCR

چكيده سابقه و هدف: عفونت دستگاه ادراري يكي از شايع ترين بيماري ها در تمامي گروه هاي سني در جهان است. مطالعه حاضر با هدف تعيين حضور ژن هاي tetB ، bla TEM dlfrA1 و cat1 مقاوم به چندين دارو در سويه هاي اشريشيا كلي اوروپاتوژنيك انجام شد. روش كار: 100 نمونه ادرار از بيماران داراي عفونت ادراري جمع آوري گرديد. باكتري اشريشيا كلي با تست هاي بيوشيميايي و ميكروبيولوژيكي شناسايي شد. با آزمون آنتي بيوگرام سويه هاي اشريشيا كلي مقاوم به دارو جداسازي گشت. سپس حضور ژن هاي مقاوم به چند دارو در اشريشيا كلي هاي اوروپاتوژنيك به روش Multiplex - PCR مشخص شد. | يافته ها: از 100 نمونه ادراري، 63 سويه اشريشيا كلي جداسازي شد. بيشترين و كمترين ميزان مقاومت آنتي بيوتيكي اشريشيا كلي نسبت به كلرامفنيكل (92 /1 ٪ ) و تتراسايكلين (33 / 3 %) بود. با آناليز مولكولي فراواني ژن هاي مورد مطالعه، TEM ، ( % 38 / 1 ) dfrA1 cat1 ، ( ٪65 / 1 ) bla (٪92 / 1 ) (بيشترين) و tetB (٪25 / 4 ) (كمترين) به دست آمد. نتيجه گيري: شيوع عفونت هاي ادراري با اشريشيا كلي در جامعه و انتشار فاكتورهاي مقاومت و بيماريزايي آن، شناسايي سريع و دقيق اين باكتري و عوامل مقاومتي آن جهت درمان اين گونه عفونت ها، ضروري به نظر مي رسد. واژگان كليدي: ژن هاي (tetB bla TEM adfrA1 و cal، اشريشيا كلي اوروپاتوژنيك، Multiplex - PCR مقدمه اشريشياكلي باسيلي گرم منفي، متحرك، بي هوازي اختياري و بدون اسپور بوده كه فلور طبيعي روده انسان ها و ديگر جانوران خونگرم است (1). اين ارگانيسم شايع ترين عامل عفونت مجاري ادراري( UTI - Urinary Tract Infection) بويژه در خانم هاي جوان مي باشد (2). اشريشيا كلي عامل بيش از 90-80 درصد از عفونت هاي مجاري ادراري كسب شده از جامعه و 50-30 درصد موارد UTI بيمارستاني است و از عوامل عمده بستري شدن در بيمارستان با عوارض قابل توجه و هزينه هاي مراقبتي بهداشتي بالا مي باشد. بروز عفونت هاي دستگاه ادراري معمولا در زنان نسبت به مردان بيشتر استو حداقل نيمي از زنان در طول زندگي خود حداقل يك بار اين عفونت را تجربه مي كنند و عود عفونت امري شايع است (3). آناتومي بدن زنان، مقاربت جنسي، سابقه خانوادگي، سن بالا، ديابت شيرين و ضعف مثانه از جمله عوامل خطرساز جهت ايجاد اين نوع عفونت ها محسوب مي شوند. شدت عفونت ادراري بستگي به عواملي مانند حساسيت ميزبان و وجود فاكتورهاي بيماري زايي در سويه هاي مولد عفونت دارد(504). مقاومت اين باكتري در مقابل آنتي بيوتيك ها مخصوصا در بيماران بستري در بيمارستان از اهميت بالايي برخوردار است (6). افزايش مقاومت دارويي در سالهاي اخير در بين پاتوژن ها بويژه عوامل مسبب UTI معضل بزرگي است كه دليل اصلي پيدايش سويه هاي مقاوم، بويژه سويه هاي مقاوم به چند دارو (Multi drug resistance - MDR )، انتشار عوامل مقاومتي به سويه هاي حساس، افزايش هزينه هاي درماني وشيوع عفونت هاي ادراري با اشريشيا كلي در جامعه و انتشار فاكتورهاي مقاومت و بيماريزايي آن، شناسايي سريع و دقيق اين باكتري و عوامل مقاومتي آن جهت درمان اين گونه عفونت ها، ضروري به نظر مي رسد.

Background and Objective Urinary tract infection caused by E. coli is one of the most common infections in the all group age in worldwide. The aim of this study was identified of dfrA1, TEM, tetB and cat1 multi drug resistance genes in the Uropathogenic E.coli isolated from clinical samples by multiplex-PCR. Materials and Methods 100 samples isolated from patients with urinary tract infections. For detection of E.coli was used biochemical and microbiological tests. By antibiogram was identified antibiotic resistance of E.coli strain. Then prevalence of dfrA1, TEM, tetB and cat1genes in the Uropathogenic E.coli isolated was finded by multiplex-PCR. Results From 100 samples, 63 were E. coli strains. The highest and lowest antibiotic resistance were detected to chloramphenicol (92.1%) and tetracycline (33.3%). By molecular analysis was identified frequency of studied genes, as, dfrA1(38.1%), TEM (65.1%), cat1 (92.1%) (highest), and tetB (25.4%) (lowest). Conclusion Prevalence of urinary tract infection in the community by E.coli and distribution of it’s resistance and virulence factors, the fast and perfect detection of this bacteria and it’s resistance genes are necessary.