تشخيص فعاليت فيبرينوليتيك در زهر افعي لبتيناي ايران

Identification of Fibrinolytic Activity in Iranian Vipera Lebetina Venom

سابقه و هدف: افعي لبيتنا (Vipera lebetina) در مناطق وسيعي از ايران زندگي مي‌كند و زهر آن حاوي انواعي از پروتئينازهاي گوناگون است كه داراي فعاليت‌هاي انعقادي و ضد انعقادي مي‌باشد. از آن‌جائي‌كه امكان نقش درماني آنزيم‌هاي فيبرينوليتيك در حل شدن لخته‌هاي خوني وجود دارد، پژوهش حاضر با هدف جداسازي اجزاء زهر خام و تشخيص فعاليت آنزيمي ضد انعقادي در زهر افعي لبتيناي ايران انجام شد. مواد و روش‌ها: در اين مطالعه تجربي اجزاي زهر خام به وسيله كروماتوگرافي ژل فيلتراسيون روي سفادكس G-100 جداسازي شدند و فعاليت‌هاي اندوپپتيداز، آرژنين استر هيدرولاز، انعقادي، ضد انعقادي و فيبرينوليتيك بر روي زهر خام و اجزاي جداسازي شده بررسي گرديد. يافته‌ها: زهر خام به وسيله كروماتوگرافي ژل فيلتراسيون به 5 جزء (PI-PV) جدا شد. 200 ميلي‌گرم زهرخام حاوي 187 ميلي‌گرم پروتئين بوده و از 187ميلي‌گرم پروتئين به كار رفته روي ستون، 7/115 ميلي‌گرم پروتئين بازيابي شد. اين زهر حاوي فعاليت انعقادي در غلظت پائين و ضد انعقادي در غلظت بالا بوده و فعاليت اندوپپتيدازي در زهر خام و همه اجزاء آن به جز PV وجود داشت. همچنين فعاليت آرژنين استرهيدرولازي در زهر خام، جزء PI و PII و فعاليت فيبرينوليتيك در زهر خام و فقط در جزء PIII مشاهده گرديد. استنتاج: نتايج اين مطالعه نشان داد كه فراكسيون زهر افعي لبتيناي ايران حاوي فعاليت‌هاي پروتئوليتيك قوي از جمله فعاليت فيبرينوليتيك مي‌باشد كه قادر به ليز مستقيم فيبرين و حل كردن لخته هاي خوني در شرايط آزمايشگاهي است

Background and purpose: Vipera lebetina lives in different areas in Iran, and its venom contains a variety of proteins with coagulant and anticoagulant activities. Fibrinolytic enzymes could have a therapeutic role in dissolution of blood clots, so, this study aimed at separating the venom components of Iranian V. lebetina and detecting its anticoagulant activity. Materials and methods: In this experimental study, crude venom components were isolated by gel filtration chromatography on sephadex G-100. We investigated the endopeptidase, arginine ester hydrolase, coagulant, anticoagulant, and fibrinolytic activities in crude venom and separated fractions. Results: The crude venom was separated into five fractions (PI-PV). 200 mg of crude venom contained 187 mg protein and 11.75 mg protein was recovered from 187 mg protein used on the column. The venom showed coagulant activity at low concentrations and anticoagulant activity at high concentrations. Endopeptidase activity was detected in crude venom and all fractions except PV. Also, arginine ester hydrolase activity was seen in crude venom, PI, and PII. Fibrinolytic activity was found in crude venom and only in PIII. Conclusion: According to this study, the venom of Iranian V. lebetina has strong proteolytic activities including fibrinolytic that dissolve blood clots by lysis fibrin directly in laboratory conditions.