بررسي اثر ماده موثره (EGCG) epigallocatechin-gallate بر توليد سلول هاي دندريتيك از مونوسيت هاي خون محيطي انساني

Effect of Epigallocatechin gallate (EGCG) on Production of Dendritic Cells from Peripheral Blood Monocytes

سابقه و هدف: سلول‌هاي دندريتيك، سلول‌هاي حرفه‌اي عرضه‌كننده آنتي‌ژن هستند كه آغازگر و تعديل‌كننده پاسخ‌هاي ايمني مي‌باشند. ماده شيميايي epigallocatechin gallate (EGCG) چاي سبز يكي از عوامل سركوبگر تومور شناخته شده است. از آن‌جايي كه اينترلوكين4 (IL-4) توليد سايتوكاين‌هاي پيش التهابي را مهار مي‌كند و EGCG نيز داراي اثر ضد التهابي و تعديل‌كننده ايمني مي‌باشد، لذا هدف از اين مطالعه، بررسي اثر EGCG در تمايز مونوسيت‌ها به سلول‌هاي دندريتيك به عنوان جايگزيني مناسب براي IL-4 بوده است . مواد و روش‌ها: در اين مطالعه تجربي، سلول‌هاي تك هسته‌اي خون محيطي با استفاده از فايكول جداسازي و سلول‌هاي مونوسيت CD14+ به روش MACS جمع‌آوري شدند. EGCG در دو غلظت µmol/l 5 و µmol/l 10 اضافه شد. سلول‌ها درروز ششم و هشتم از جهت شاخص‌هاي تمايزي CD83، HLA-DR و CD11bبه روش فلوسيتومتري ارزيابي شدند. IL-23 و IL-35 نيز در مايع رويي كشت سلولي بررسي شدند. يافته‌ها: مولكول‌هاي CD11b و CD83 در سلول‌هاي دندريتيك بالغ و نابالغ، تفاوت معني‌داري بين دو روش داشت (0/05< P) مولكول HLA-DR در سلول‌هاي دندريتيك نيز تفاوت معني‌داري داشت(05/0< P). IL-23 و IL-35 در مرحله نابالغ نسبت به سلول‌هاي دندريتيك بالغ تفاوت معني‌داري نداشتند ولي در مرحله بالغ بين دو روش تفاوت معني‌داري ديده شد (0/05< P). استنتاج: بر اساس نتايج اين مطالعه، EGCG درمقايسه با IL-4 توانايي تمايز مونوسيت‌ها به سلول‌هاي دندريتيك نابالغ را دارد و به‌نظر مي‌رسد اين مولكول باعث توليد سلول‌هايي دندريتيك با خاصيت تولروژنيك نسبت به روش كلاسيك مي‌شود.

Background and purpose: Dendritic cells are professional antigen presenting cells that initiate and modulate immune responses. Epigallocatechin gallate (EGCG) is identified as a prophylactic agent that can suppress tumor formation. This research aimed at investigating the effect of EGCG on differentiation of dendritic cells from monocytes and as a potential substitute for IL-4 in this process. Materials and methods: In this experimental study, blood samples were drawn and peripheral blood mononuclear cells were isolated using FICOL. The monocytes CD14 + were purified by MACS. EGCG was added in 5 μmol / l and 10 μmol / l. On days six and eight, the cells were analyzed and differentiation factors such as CD83, HLA-DR, and CD-b were evaluated using flow cytometry. In addition, IL-23 and IL-35 levels were measured. Results: CD-11 and CD11b levels in mature and immature dendritic cells were significantly different between the two paths (P<0.05), HLA-DR levels were also significantly different in dendritic cells (P<0.05). IL-23 and IL-35 levels in mature and immature dendritic cells were not significantly different, whereas these levels in mature dendritic cells showed significant differences between the two paths (P<0.05). Conclusion: This study showed that EGCG compared to IL-4 can initiate monocyte differentiation to dendritic cells and this molecule can turn monocytes to dendritic cells with tolerogenic qualities compared to the classic path.