بررسي اثرات بيان پروتئين فيبرومودلين بر روي مسيرهاي پيام رساني NFkB و TGFβ در سلول هاي سرطان كبد

Effects of fibromodulin protein expression on NFkB and TGFβ signaling pathways in liver cancer cells

ميزان بروز سرطان كبد به طور پيوسته در حال افزايش است. در حال حاضر، ژن درماني براي بهبود چالش هاي پزشكي گوناگوني از جمله درمان سرطان مورد بررسي قرار مي گيرد. فيبرومودلين از طريق تعامل با فاكتورهاي رشد و رسپتورهاي مسيرهاي پيام رساني در بسياري از فرآيندهاي زيستي و فيزيولوژيكي دخالت مي نمايد. اين مطالعه با هدف بررسي اثرات بيان ژن فيبرومودلين بر روي مسيرهاي پيام رساني NFkB و TGFβ در سلول هاي سرطان كبد با رويكرد بررسي ژن هاي مسيرهاي مولكولي درگير در اين سرطان انجام شد. مواد و روش ها سلول هاي سرطان كبد انساني Huh-7 كشت داده شد و اثر تيمار با فيبرومودلين بر روي رشد و تكثير سلول ها با استفاده از تست MTT سنجيده شد. سپس با استفاده از ليپوفكتامين، ژن فيبرومودلين را به داخل سلول ها ترانسفكت كرده و بيان ژن هاي SMAD2/3 و TGFβ را با استفاده از روش Real time-PCR مورد سنجش قرار گرفت. يافته ها تاثير فيبرومودولين بر بيان ژن هاي TGFβ و SMAD2/3 در رده ي سلولي سرطان كبد انساني Huh-7 بررسي شد. نتايج نشان داد فيبرومودولين موجب تنظيم كاهشي اين ژن ها در سلول هاي ترانسفكت شده با ژن فيبرومودولين در مقايسه با سلول هاي كنترل گرديد. هم چنين نتايج MTT نشان داد كه تيمار با فيبرومودولين موجب افزايش رشد و تكثير سلول هاي Huh-7 به طريق وابسته به دوز مي شود. نتيجه گيري مطالعه ي حاضر نشان داد فيبرومودلين به طور معناداري ميزان بيان ژن هاي مسير TGFβ و NFKB را در سلول هاي سرطان كبد كاهش داد. هم چنين تيمار رده ي سلولي سرطان كبد با فيبرومودلين سبب افزايش رشد سلول ها گرديد. به نظر مي رسد ژن فيبرومودلين داراي اثرات ضد سرطاني بر روي سلول هاي سرطان كبد است.

The incidence rate of liver cancer is continuously increasing. Currently, gene therapy is applied to improve various medical issues such as cancer treatment approaches. Correspondingly, fibromodulin involves in many biological and physiological processes through interaction with growth factors and signaling pathway receptors. The aim of this study was to investigate the effects of fibromodulin gene expression on NF-kB and TGF-β signaling pathways in liver cancer cells in order to investigate the molecular pathway genes involved in this cancer. Materials and Methods Huh-7 human liver cancer cells were cultured and the effect of fibromodulin on cell growth and proliferation was assessed using MTT assay. Then, fibromodulin gene was transfected into cells using lipofectamine and the expression of SMAD2 / 3 and TGF-β genes were investigated by Real-Time PCR method. Results The effect of fibromodulin on TGF-β and SMAD 2/3 expression genes was evaluated in liver cancer cell line. Fibromodulin down-regulated the TGF-β and NF-kB pathways in transfected cells, compared to the control. Also, MTT results demonstrated that treatment with fibromodulin increased growth and proliferation of Huh-7 cell line in a dose-dependent manner. Conclusion According to the results of the study, fibromodulin significantly decreased the expression levels of TGF/β and NF/kB pathway genes in liver cancer cell line. Furthermore, growth and proliferation of liver cancer cells were increased after treatment with fibromodulin. It seems that fibromodulin gene has anticancer effects on liver cancer cells.