بررسي مولكولي وجود ژن‌هاي حدت SHV و TEM در سويه‌هاي اشريشياكلي مقاوم به آنتي‌بيوتيك جدا شده از نمونه‌هاي ادراري شهرستان جيرفت

Molecular study of virulence genes SHV and TEM in antibiotic resistant Escherichia coli strains isolated from urethral specimens in city of Jiroft

زمينه و هدف: باكتري اشريشياكلي يكي از اعضاي خانواده انتروباكترياسه مي‌باشد كه به عنوان يكي از رايج‌ترين عوامل عفونت ادراري شناخته شده است. آنزيم­هاي بتالاكتامازي، مهمترين عامل مقاومت به آنتي ­بيوتيك­هاي خانواده بتالاكتام در ميان باكتري­هاي گرم منفي است. با توجه به افزايش روز افزون عفونت ادراري ناشي از اشريشياكلي مقاوم به آنتي بيوتيك هدف از اين پژوهش تحيقيق پيرامون الگوي حساسيت آنتي بيوتيكي نسبت به آنتي­ بيوتيك­هاي بتالاكتام و بررسي وجود ژن­هاي بتالاكتاماز (ESBL) SHV و TEM در نمونه هاي اشريشياكلي جداشده از بيماران مبتلا به عفونت ادراري مي باشد. روش كار: در اين پژوهش 181 سويه اشريشياكلي از نمونه­هاي ادرار افراد مبتلا به عفونت ادراري جمع آوري شد، سپس بررسي حساسيت آنتي بيوتيك به روش Disk diffusion انجام گرفت. به منظور تاييد فنوتيپي اشريشياكلي هاي مولد بتالاكتامازهاي وسيع الطيف (Extended-spectrum beta-lactamases-ESBL) از روش Combined Disk test استفاده گرديد و در نهايت حضور ژن­هاي بتالاكتامازي SHV و TEM در ايزوله­هاي ESBL مثبت توسط روش Multiplex PCR مورد بررسي قرار گرفت. يافته‌ها: از مجموع 181 ايزوله، 66 (46/36 درصد ­) ايزوله مقاوم به سفوتاكسيم و 82 (30/45­ درصد) ايزوله مقاوم به سفتازيديم بودند. همچنين 58درصد ايزوله ESBL مثبت بودند كه از اين تعداد 16 (33­ درصد) ايزوله حامل ژن SHV، 28 (58­ درصد) ايزوله حامل ژن TEM و همچنين 3 (6­ درصد) ايزوله­ها حامل هر دو ژن SHV و TEM بودند. نتيجه‌گيري: با توجه به اينكه توليد ESBL تهديدي بزرگ براي جامعه به شمار مي­رود بنابراين ضروري به نظر مي­رسد كه براي شناسائي اين نوع از مقاومت­ها از روش­هاي مولكولي مناسب در كنار ساير روش­هاي فنوتيپي استفاده شود.

Background: Escherichia coli (E.coli) bacteria are member of Enterobacteriaceae which are one of the common causes of urinary tract infections. Beta-lactamase enzymes are important factors for antibiotic resistance of beta-lactam family in gram-negative bacteria. According to increasing rate of urinary tract infections due to antibiotic resistant E. coli, the aim of this study was to study the antibiotic sensitivity pattern relative to beta-lactam antibiotics and the presence of SHV and TEM beta-lactamase genes in E. coli specimens isolated from patients with urinary tract infections. Methods: In a descriptive study, 181 E.coli strains are collected from urine of patients with urinary tract infections and then the sensitivity of the antibiotic is measured by Disk diffusion method. Combined Disk test is used for confirming ESBL-producing E. coli phenotype and finally, the presence of SHV and TEM beta-lactamase genes in ESBL positive isolates were analyzed by multiplex PCR. Results: From 181 isolates, 66 strains (36.46%) were resistant to cefotaxime and 82 strains (45.30%) were resistant to ceftazidime. Also, 58 percent of isolates were ESBL positive, 16 strains (33%) of them were the carrier of SHV gene and 28 strains (58%) were the carrier of TEM gene and also 3 isolates (6%) were the carrier of both TEM and SHV genes. Conclusion: According to the production of ESBL which is considered as a great threat to society, it seems it is essential to use suitable molecular methods along with other phenotypic methods to identify this type of resistance