بررسي بيان ژن DNase فعال شونده توسط كاسپاز (CAD) در رده ي سلولي سرطان پستان MCF-7 تيمار شده با نانو ذرات نقره زيستي

Assessment of caspase activated DNase (CAD) gene expression on MCF-7 breast cancer cell line treated by biosynthesized silver nano particles

مقدمه سرطان پستان رايج‌ترين سرطان در ميان زنان و دومين علت رايج مرگ ناشي از سرطان‌ها مي‌باشد. به علت مقاومت اكتسابي سلول‌هاي سرطاني به درمان‌هاي رايج و عود مجدد بيماري پس از درمان، استراتژي‌هاي درماني نوين براساس راه اندازي مجدد آپوپتوز مطرح شدند. هدف از انجام مطالعه حاضر، بررسي اثرات سميت نانوذرات نقره زيستي و ارزيابي بيان ژنCAD (DNase فعال شونده توسط كاسپاز) بر روي سلول‌هاي سرطاني پستان (MCF-7) مي‌باشد. مواد و روش­ها سنتز نانوذرات نقره با استفاده از عصاره اتانولي برگ گياه درمنه آرتميزيا كوتنسيس مطابق مطالعات گذشته انجام گرفت. اندازه و ريخت‌شناسي نانوذرات با كمك ميكروسكوپ الكتروني عبوري (TEM) بررسي شد. رده سلولي MCF-7 در غلظت‌هاي مختلف 25/6، 5/12 ، 25 ، 50 ،100 و 200 µg/ml تيمار 24 ساعته نانوذرات نقره سنتز شده انجام گرفت و با كمك روش MTT ارزيابي و ميزان 50 درصد كشندگي IC50 محاسبه شد. ميزان بيان ژن CAD با روش PCR time Real ارزيابي شد. يافته­ها اندازه متوسط نانوذرات با كمك ميكروسكوپ TEM حدود 86/4 ± 13/9 نانومتر بدست آمد. نانو ذرات نقره داراي اثرات سميت به صورت وابسته به دوز بر روي رده سلوليMCF-7 بود. ميزان IC50 نانوذرات نقره µg/ml 49 محاسبه شد. ميزان بيان ژنCAD در نمونه تيمار نسبت به كنترل به ميزان 77/0 برابر كاهش( 05/0P <) نشان داد. نتيجه­گيري ارزيابي نتايج اين تحقيق نشان داد كه نانوذرات نقره اثراث سميت قابل قبولي بر روي رده سرطاني پستان دارد و نياز به انجام آزمايشات بيشتر در مدل‌هاي حيواني مي‌باشد.

Introduction Breast Cancer is the most prevalent type of cancer among women and is also the second major cause of cancer. Due to the acquired resistance of cancer cells against conventional therapies and recurrence of the sickness after treatment, new therapeutic strategies based on triggering apoptosis have been proposed. The purpose of the present study is to introduce a cytotoxic effect of biological silver nanoparticles toward breast cancer MCF-7 cells and evaluation of the caspase-activated DNase (CAD) gene expression at mRNA level. Materials and Methods Silver nanoparticles were synthesized according to the recent biosynthesize method. Afterward, the Silver nanoparticles were inspected using transmission electron microscopy (TEM) analysis. Different concentrations of 6.25, 12.5, 25, 50, 100, and 200 µg/ml of Nanosilver particles were treated on MCF-7 cells for 24 hours and the results were evaluated using the MTT assay and IC50 were measured. The level expression of CAD gene was evaluated using real-time PCR. Results Silver nanoparticles were mostly spherical, having an average size of 9.13±4.86 nm. Silver nanoparticles demonstrated a dose-dependent toxic effect toward MCF-7 cells. The IC50 value of silver nanoparticles was measured 49μg/mL. In addition, the expression of CAD decreased by 0.77 fold, compared to the control group. Conclusion The results of the present study demonstrated that the silver nanoparticles can induce cytotoxicity against breast cells and it is necessary to perform more tests against animal models.