شناسايي مورفولوژيكي و مولكولي قارچ‌هاي ميكوريز آربوسكولار همزيست با ريشه پسته در استان كرمان

Molecular and Morphological Identification of Arbuscular Mycorrhizal Fungi Associated with Pistachio Roots in Kerman Province

قارچ هاي ميكوريز آربوسكولار، موجب بهبود رشد گياهان و مقاومت بيشتر به تنش هاي زيستي و غيرزيستي مي شوند. به منظور شناسايي مولكولي و مورفولوژيكي قارچ هاي ميكوريز آربوسكولار، از منطقه ي ريزوسفر درختان پسته استان كرمان در سال هاي 1393-1392 نمونهبرداري انجام شد. اسپورهاي قارچ ميكوريز آربوسكولار از خاك هاي نمونه برداري شده با استفاده از روش الك مرطوب جداسازي و بر اساس ويژگي هاي مورفولوژيكي مانند رنگ اسپور، شكل، تزئينات سطح، اندازه و ساختار ديواره آن ها گروه بندي شدند. استخراج DNA از تك اسپور انجام شد. بخشي از ناحيه18S rDNA با استفاده از آغازگر عمومي NS4 و آغازگر اختصاصي قارچ ميكوريز آربوسكولار AML1 در مرحله اول و آغازگرهاي اختصاصي قارچ ميكوريز آربوسكولارAML1/AML2 در مرحله دوم واكنش PCR آشيانه اي، تكثير شد. براساس بررسي هاي مورفولوژيكي و مولكولي، گونه هايFunneliformis mosseae ، Claroideoglomus claroideum وRhizophagus iranicus شناسايي گرديد. گونه R. iranicus براي فلور قارچي درختان پسته جديد مي باشد. با توجه به محدوديت ويژگي هاي مورفولوژيكي در شناسايي و تاكسونومي اين گروه مهم از قارچ ها، روش هاي مولكولي مي توانند به عنوان مكمل روش هاي مورفولوژيكي موجب اطمينان بيشتر در تاكسونومي و تمايز گونه هاي مشابه به حساب آيند

Arbuscular mycorrhiza fungi (AMF) promote plant growth and enhance resistance against biotic and abiotic stresses. In order to study morphological and molecular identification of AMF, samples of rhizosphere soil of pistachio orchards in Kerman province were collected during 2013-2014. AMF spores were extracted from the soil samples using wet sieving and were assorted based on morphological characteristics such as spore color, shape, surface ornamentation, spore contents and wall structures. DNA was extracted from a single spore. Partial 18S rDNA was amplified by nested PCR method using universal primer NS4 and AML1 in the first amplification and AML1/AML2 in the second amplification. Based on the morphological and molecular criteria, Funneliformis mosseae, Claroideoglomus claroideum and Rhizophagus iranicus were identified. R. iranicus is the new record for pistachio mycoflora. Due to the limitations of morphological characteristics for identification and taxonomy of this important group of fungi, molecular methods can apply as complementary tools for the differentiation of morphologically similar species and taxonomic purposes.